试着解释一下,有错请指正 Cy5受红光激发之後,如果再持续照射,那麽在photobleaching 之後会形成radical-electron 或是 radical-hole pair 这就是该paper里所称的dark state (请注意这并非原来的original state) 而如果再对处於dark state的Cy5照射大约300-532nm的光 并且加上一个electron/hole donor (也就是Cy3在此扮演的角色) 就可以让Cy5重新被激发到fluorescent state (所以如果Cy3距离Cy5太远,doner效果就不好,Cy5就不容易被重新激发) 这称之为Cy5的reversible optical switch特性 要厘清的一点是 这个特性底层的原理是photoinduced electron transfer (PET) 而不是FRET PET的有效作用距离比FRET更短, 两者的kinetics pattern也不一样 最後补充一点 虽然目前知道Cy5具有这样的特性 但是对於此特性在分子结构上的形成原理还没有定论 Reference: JACS (2005) 127:3801-3806 ※ 引述《amnesiachick (;l;l)》之铭言： : 有几个跟Cy5有关的问题 希望知道的人能够给点指点^^ : Red laser light that produces fluorescent emission from Cy5 can also : switch the dye to a stable dark state. Exposure to green laser light : converts Cy5 back to the fluorescent state, but the recovery rate : depends critically on the close proximity of a secondary dye, Cy3. : 主要是有关这一段的问题.在看到这篇paper以前我认知中的Cy5是照红光就会亮, : 然後就一直亮到它photobleach为止.所以我看不懂为什麽red laser会 : "switch the dye to a stable dark state".而且这里green laser的存在目的是什麽呢? : 如果不照green laser, 一直照red laser, Cy5就不会再亮了吗? : "green laser light converts Cy5 back to the fluorescent state", : fluorescent state不是指excited state吗?可是在paper里面照绿光的 : 时候是没有emission的. 这几部分我真的很疑惑. : 另外请问Cy3跟Cy5之间的距离会影响recovery state的问题,这应该从哪个角度去解释呢? : 因为我查相关资料,里面也只是提到这个现象,但并没有详细解释为什麽? : 拜托大家了^^ -- ※ 编辑: nightcatman 来自: 163.1.159.199 (04/13 18:48)