作者DreamShop (梦想专卖店)
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标题Re: [求救] 关於Cy5的发光机制
时间Fri Apr 13 03:15:17 2007
※ 引述《amnesiachick (;l;l)》之铭言：
: 有几个跟Cy5有关的问题 希望知道的人能够给点指点^^
: Red laser light that produces fluorescent emission from Cy5 can also
: switch the dye to a stable dark state. Exposure to green laser light
: converts Cy5 back to the fluorescent state, but the recovery rate
: depends critically on the close proximity of a secondary dye, Cy3.
: 主要是有关这一段的问题.在看到这篇paper以前我认知中的Cy5是照红光就会亮,
: 然後就一直亮到它photobleach为止.所以我看不懂为什麽red laser会
: "switch the dye to a stable dark state".而且这里green laser的存在目的是什麽呢?
: 如果不照green laser, 一直照red laser, Cy5就不会再亮了吗?
: "green laser light converts Cy5 back to the fluorescent state",
: fluorescent state不是指excited state吗?可是在paper里面照绿光的
: 时候是没有emission的. 这几部分我真的很疑惑.
: 另外请问Cy3跟Cy5之间的距离会影响recovery state的问题,这应该从哪个角度去解释呢?
: 因为我查相关资料,里面也只是提到这个现象,但并没有详细解释为什麽?
: 拜托大家了^^
这篇的意思似乎是将cy3和cy5结合在一起
先用红光quench掉cy5 (dark state)
再用绿光激发cy3 让cy3经由FRET去激发cy5
这个过程是随机的(stochastic)
因为大部分的cy5已经被quench
而cy3诱发的cy5又是随机的 所激发的cy5很少
因此可以达到single molecular imaging
ps.(quench 跟 irreversible bleach定义上应该不一样)
ps2. 这概念感觉有点像 stimulated emission depletion (STED) microscopy
ps3.很贵
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 128.120.141.116
1F：推 nightcatman:不, 不是FRET, 请看ref[14]第一页最後"We note.."那句 04/13 03:19
2F：推 nightcatman:另外ref[14]里也有说到,他们知道Cy3的存在可以增加Cy5 04/13 03:25
3F：→ nightcatman:switch back的机率,但Fig4(b)显示这并不是因为FRET而 04/13 03:26
4F：→ nightcatman:是有其他的原因 04/13 03:27
5F：推 oplz:果然是庄小威那一篇, 这技术没甚麽实用价值..其实成本还好 04/13 11:48
6F：→ oplz:可参考 palm, 基本上是同样的技术 两者同时发表. 04/13 11:49
7F：推 oplz:还有这跟 STED 完全不一样, STED 是同时在 sample 的上下照 04/13 11:54
8F：→ oplz:想法很厉害 但很难用..专利还在申请中 所以买不到. 04/13 11:55
9F：→ oplz:STORM/PALM 只是拿讯号的最中心做标定, 分次把整个 sample 照 04/13 11:56
10F：→ oplz:完而已..对 fix sample 都得照个一天, 没啥用处.. 04/13 11:58
11F：→ oplz:因为还没商业化,据说估计 STED 一台要六百万美金 , 你会买吗? 04/13 12:00
12F：推 oplz:sorry, 打错 (STED 是红绿光同时在 sample 的上方照) 04/13 12:05
13F：推 DreamShop:庄小威?? 这名字挺好笑的... 04/13 16:18
14F：推 amnesiachick:名字好笑 可是人很厉害 =.=+ 04/13 17:11