作者kuroo (新资料爽)
看板Biotech
标题Re: [问题] PCR, Tm值差很多的primer
时间Wed Apr 11 13:50:37 2007
※ 引述《Porkcan (Threatening)》之铭言：
有种PCR方法是分开做
先用一条Primer做出单股
再加入另一条Primer继续跑另一组Cycle
做出另外一股
这样就可以设定个别最佳的Tm罗
不然就把Tm低的primer序列延伸
看能不能多弄几个GC
: 手上有一组primer
: annealing temperature最佳是60度啦
: 不过有试过到40度也可以做的出来
: 我想要拿其中的Forward或是Reverse primer来跟oligo d(T)配成一对进行PCR
: 但是Oligo d(T)的温度似乎很低 25度?
这样在Elongation的温度下
Oligo d(T)不会飞走吗？ @@"
: 不知道这样两个primer之间的Tm值相差这麽多
: PCR要怎麽去调整
: ps有做过gradient PCR, 大概从35~45度, 不过没有product
: 还是就直接把Tm降到25度配合oligo d(T)勒？
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