作者janmei (展眉)
看板Biotech
标题Re: [求救] colony PCR有P到 但定序无结果
时间Thu Apr 5 18:47:34 2007
※ 引述《MrCAKE (Keep Working)》之铭言：
: ※ 引述《jazzdevil (Joyce)》之铭言：
: : 对啊,通常我们都直接抽质体 用不同enzyme去多重check..
: : 就不会有这种问题 用pcr总是偶尔会有一些假性的clone出现
: 这其实并没有一定的道理
: enzyme digestion比较准确
: 但colony PCR也有他的好处在
: 毕竟前者要先抽plasmid而且还必须要有合适的限制脢可用
: 决定要用哪个方法前也可以稍微计算一下成本的问题
colony pcr 比较快可以知道结果
但是电泳跑胶看到的band 必须要是很明显粗粗的
才代表这个菌比较有可能真的带有你要的insert在里面
因为pcr放大效果很明显
所以有时会放大到未进入菌体的片段
也就是你会看到有p出band来
但实际上是没挑到的
每个实验室习惯都不同
有的养菌抽mini用enzyme来确定 是真的比较准
但是会比PCR要花多点时间才能知道结果
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◆ From: 122.124.99.201