作者flywind1209 (飞翔风~)
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标题Re: [问题] Lipofectamine 2000
时间Thu Apr 5 01:08:45 2007
※ 引述《aggaci (学钢琴，左手怎麽那麽笨)》之铭言：
: ※ 引述《ad1980 (Apoptosis)》之铭言：
: : 不好意思，因为一样是关於Lipofectamine 2000的问题，
: : 所以直接用原来的标题。
: : 它给的protocol上面写说，
: : for plasmid transfection, high cell density (90-95%) to minimize cell death.
: : 可是在RNA transfection 那边，
: : 写说tranfection condition 的cell denisty是30-50% confluent。
: : 为什麽一样都是Lipofectamine 2000，
: : RNA transfection 的时候只要30-50% confluent 就够了，
: : 可是plasmid 却要90-95%才能 minimize cell death？
: : 我试过大概70%以下就会死很多细胞，
: : 如果是Lipofectamine的原因，那RNA transfection的时候，
: : 细胞不是死光光了嘛？
: : 为什麽RNA transfection就不用90-95% confluency
: : 来 minimize cell death 呢？
: 我建议 如果要做RNAi transfection，建议用它新出的Lipofectamine RNAiMAX
: 因为第一:毒性低，第二:RNAi不需太多效果就很好
: (我knockdown efficiency可达90%以上)
: 其实细胞多的话，transfection效果的确比较差！
: p.s 我其实很不建议DNA transfection用lipofectamine 2000，毒性太强了！
: Mirus TL1、transfast都比2000好，毒性低，效果不会比较差，也不会比较贵
其实有时候要看细胞的特性 再来决定cell confulent或是要用哪一家的reagent
像HeLa S3用lipo2000效果绝对比LT1好 至少有9成 送RNA也没问题 因为HeLa细胞
比较不容易叠 很好送 所以我觉得细胞特性 站蛮大因素的 当然medium也有差
比如说serum好坏就真的差很多罗 不同牌子serum所养起来的细胞 外观看不太出来
但Tx efficiency绝对有影响 以上只是小小心得 参考 参考
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