作者aljkpyy (hihi)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请问ligation的一些问题
时间Thu Apr 5 00:26:23 2007
※ 引述《icosm (...)》之铭言：
: 就是我最近在做一个ligation
: size分别为insert 3.4 kb vector 3.3kb
: 我用限制脢将vector切开後 再用CIP处理一小时
: 然後就进行ligation 以浓度比insert:vector=3:1来做
: ligation的条件为16度 o/n
: 然後以heat-shock进行transform
: 再以selection medium的方式涂盘筛选
: 涂盘o/n後 都发现一颗都没长><....
: 表示连self-ligation的结果也没有
: 我已经做了三四次了 结果都是一样
: 但是如果只transform空的vector(没切过的) 就有长出来
: 我真的不知道是那里出了错
: 请教各位前辈给我一些建议~~感谢!!
一颗都没长 会不会是抗生素加的量过多
导致全部杀光光
plasmid的抗药性也是有极限的
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.175.60.69