作者icosm (...)
看板Biotech
标题[问题] 请问ligation的一些问题
时间Wed Apr 4 11:52:29 2007
就是我最近在做一个ligation
size分别为insert 3.4 kb vector 3.3kb
我用限制脢将vector切开後 再用CIP处理一小时
然後就进行ligation 以浓度比insert:vector=3:1来做
ligation的条件为16度 o/n
然後以heat-shock进行transform
再以selection medium的方式涂盘筛选
涂盘o/n後 都发现一颗都没长><....
表示连self-ligation的结果也没有
我已经做了三四次了 结果都是一样
但是如果只transform空的vector(没切过的) 就有长出来
我真的不知道是那里出了错
请教各位前辈给我一些建议~~感谢!!
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