※ 引述《wkj1020 (Aj)》之铭言： : ※ 引述《wkj1020 (Aj)》之铭言： : : pET41a, pGEX-4T1 都是在N端接GST的vector : : 请问一下这各vector除了厂商, 抗生素 有差之外 : : 有没有其他的差别?? : : 还有BL21(DE3) 跟 rosetta(DE3)(可能拼错 是听来的) : : 这两支菌有什麽差别??? : 事实上会问这各问题 : 是因为我的蛋白在pET41a表现完後会断掉(就是在PAGE看到GST的BAND) : 有人跟我说在pGEX 系统比较不会断(!!?) : 不知道原理是什麽所以想了解一下 我用的是pGXE2T的vector， 但我的recombinant protein也会断掉， 我认为protein会truncated，应该是protein在E. coli本身的问题(如：你的protein在E. coli有protease的hot spot) 或lysis中degrad掉了， 你可以多试其他的E. coli expression host或是induction的环境(例如调整较mild温度 或IPTG浓度) 我之前用serine protease knockout E. coli并没有改善truncated的现象， 但你也可以试试喔， 我最後是改变induction环境，断掉的protein就少很多了， 祝你实验顺利^^ --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.206.250 ※ 编辑: turtledodoha 来自: 140.112.206.250 (03/26 01:28)