作者aggaci (学钢琴,左手怎麽那麽笨)
看板Biotech
标题Re: [问题] 突发奇想细菌作的recombinant GFP会亮吗?
时间Sun Mar 25 19:01:11 2007
※ 引述《leoblack (风的使者)》之铭言:
: ※ 引述《Mouseking (叫我老鼠王....-_-)》之铭言:
: : 请教各位先进
: : 如果我把EGFP放进BL21
: : IPTG induction後
: : 可以纯化出一管会发萤光的蛋白质吗?
: : 一时好奇......有人试过吗?谢谢?
: 可以,我看人作过~
: 但是要纯化出那些EGFP有点困难
: 你要怎麽纯化呢?!
: 想在EGFP後面加tag嘛?!
对
: 另外纯化後你怎麽保存呢?!
50% glycerol冰-20度
: 会发萤光的蛋白通常是有不稳定的电子结构在
: 所以在受到紫外光照射後会放能产生可见萤光
: 所以这後续的纯化及保存问题可能要再进一步讨论
: ---以下是发牢骚内容,易激动者勿看---
: 另外
: 我个人反倒是对於原po会想到这样的问题
: 抱持赞赏的态度
: 念生物的都知道,没有"绝对"这件事
: 不是什麽观念都是可以直接平行地转移到其他不同生物体上
: 很多实验是要作过才知道可行不可行
: 个人是不知道原po在实验室里待过多久了
: 实验经验有多少了
: 但不可否认的,所有的实验对於没作过的人来说
: 都可以算是novel的实验
: 今天会有这样的疑问表示有创意的点子产生
: (至少是对他个人而言)
: 他有在想,有想去尝试
: 但唯一欠缺没做到的,就是去"查资料"
: 去查查看是否有前人作过类似的实验
: 至於那些会觉得"这是什麽烂问题?"
: 会觉得问这种问题很没程度的人
: 我觉得这有点"倚老卖老"的心态
: 或是像老鸟瞧不起菜鸟的心态~
: 或许是因为你作过这个实验或相类似的实验,所以你知道可以
: 或许你只是单纯的推理觉得应该可行,所以你觉得可以
: 但,不懂为什麽要去挞伐提出这个疑问的人?!
: 别人就是没作过嘛,阿是不能提出疑问喔
: 没必要酸别人吧~
: 以上
通常新手做这个实验拿到protein第一个反应是 "哇!!亮晶晶的ㄝ"
然後到处拿给别人看,别人(若是新手)反应通常是"哇!这是萤光笔墨水吗"
而且,没有人发牢骚阿~~~~^^
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◆ From: 140.114.100.165
※ 编辑: aggaci 来自: 140.114.100.165 (03/25 19:03)
1F:推 witchs:萤光笔墨水...做间谍情报的或许可以用用看..^^ 03/25 19:36