作者jimmytseng (大大凯)
看板Biotech
标题[方法] linker
时间Fri Apr 21 22:42:01 2006
请教一下各位大大有人用过这种方法吗
我解释一下用法
首先因为只要接76bp所以设计两条类似primer的东西
不过他的长度为76bp加上Xho I的长度示意图如下
Xho I C^TCGAG所以我们这样设计
TCGAG.................................C
C.................................GAGCT
分别合成上股跟下股然後先将两股各取大概1ug放在一起水加到20ul
加温到95度5min 後用大量的衣服包起来使其温度缓慢的下降
约降至室温时就可以做ligation了
我所说的就是这个方法请问有人用过还有什麽注意事项吗????
ligation成功率又如何呢???
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◆ From: 61.31.135.203
1F：推 bahnhof:要用PNK把尾巴磷酸化才接的起来 04/21 22:53
2F：推 blence:或者既然用买的,就直接订5'phospho modified的primer 04/22 01:35