※ 引述《ROKEE (可不可以不要再胖下去啦~)》之铭言： : ※ 引述《aggaci (有气质的台客)》之铭言： : : 请问一下 : : 最後silver stain时 : : 加silver 反应 20min : : (为什麽这一步会整片PAGE变的黄黄的??) : : 之後用水迅速地洗两遍之後 : : 再以develop buffer将银还原呈色 : : 这一步一加下去，整片PAGE背景又更深了(差不多develop 1分钟左右而已) : : 跟昆布一样 : ^^^^ 真贴切的形容词 >< : 我觉得你要不要把整个silver stain protocal放上来让大夥看看? : 至少我身边3间实验室各自的银染手法都不太一样 : : 为什麽会降子呢? : : 是玻璃盆的问题吗(我只用二次水洗过，有人说得用强酸洗过) : 这没关系，我的染盆是多用途的咧，染Commassie blue、做western、银染 : 都用同一个 XDDDD : : PAGE不是该是乾净透明无色的吗? : : 这样真的很丑 : 我自己的撇步啦，formaldyhyde多放一点，大概多个15~20%吧 : 这样呈色速度快一点的话或许可以避免你上述的「昆布效应」 :p 真的吗?? 没什麽副作用吗? : : 有没有什麽办法能改善呢? 谢谢 : 我猜是因为在AgNO3後的水喜步骤不够乾净 : 所以有残留的银在PAGE上，导致Na2CO3呈色时Ag的颜色就跑出来了 欧 可是我在加硝酸银的那一步就有黄色的background了呢 我看别人都不会阿~ 我的步骤是 1. 50 ml actetic acid + 200 ml methanol + ddH2O 250 ml 2hr 2. 160 ml methanol + 1.6g sodium thiosulfate + 34 g sodium acetate 30min 3. 500 ml ddH2O 5 min*3 4. 1.25 g silver nitrate/500 ml ddH2O 20min 5. 500 ml H2O wash 1min*2 6. 12.5g sodium carbonate + 200 ul formadehyde/500 ml ddH2O 4min~10min 7. 6g EDTA 10min 8. 500 ml ddH2O 奇怪 我有看到在第4步有人会加formadehyde的 降子银不会被提早还原吗??? 对了!谢谢您的回覆噜 -- http://0rz.net/da0PG 我的相簿.... --

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