作者nothingelse (上邪)
看板Biotech
标题[问题] mouse tissue RNA
时间Wed Apr 19 00:22:34 2006
有人利用Trizol抽过老鼠tissue RNA吗
我是先作thymus和spleen这两种tissue
先把organ磨碎取得suspension cell
之後再把cell离心下来用Trizol lyse
第一次有先算细胞1ml Trizol / 10^7cell
结果沉淀完没有pellet完全没有东西
第二次提高浓度1ml Trizol / 4x10^7
沉淀完有看到小小的pellet 溶到15ul的DEPC-H20
测量浓度以後发现rna超少的
total大概只有2ug-5ug
跑个小gel几乎也都用完
後来发现RNA degrade的很严重
smear很严重 28s和12s的signal弱弱的比例也不正常
之後还要作northern blot
这样的量真的是超级少的吧 T_T
想请问大家..
(1) tissue RNA的抽法有什麽比较需要注意的吗
(2) 又哪里可以找到一般mouse tissue抽出来RNA的量"应该"多少的资讯
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