作者oscarcc (捕捉属於自己的梦)
看板Biotech
标题Re: [问题] 有关plasmid
时间Tue Apr 11 00:26:35 2006
※ 引述《Aqqqa (没有昵称)》之铭言:
: ※ 引述《Ackbar ()》之铭言:
: : 今天跟学长做实验
: : 学长说plasmid DNA不可以vortex
: : 会把plasmid弄断
: : 想请问各位版友
: : plasmid不是circular form吗
: : 怎麽会断呢
: 这边该想一个问题
: 抽取genomic DNA时会不会抽到plasmid?
: 抽取plasmid DNA时, 那genomic DNA是在哪一步骤去掉的?
如果你是用加入solution I, II, III的方法,最後在solutionIII後,
会有混浊的渣渣和下面比较澄清的液体,离心之後,渣渣里面包含菌体的残骸及
genomic DNA,而澄清液里面就含有你要的plasmid DNA
(主要是利用Solution II里面的强硷将DNAdenature, 而Soluion III的醋酸将
DNA renature)
: 总不能加DNase吧
: 抽取plasmid DNA时不能vortex主要是避免genomic DNA被弄断
: 这样会有小片段的形成, 就不能在之前的步骤和蛋白质一起被沉淀去除掉
: 至於plasmid DNA extraction技术再怎麽好
: 大多还是三种forms会出现
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