※ 引述《smallhii (期月考)》之铭言： : 请问一下各位前辈괳 : 若是在进行对E-coli的transformation : 但是长出来的E-coli只数十颗(不到30颗) : 转殖成功的又只占不到10颗 orz : 跟同学的相比 每一个人都几乎上百颗起跳 : 请问会是我在处理competent cell上时出现问题吗 competent cell处理时　尽量保持在冰上作业 也尽量保持静置 加入plasmid後也别拿起来摇　小心的用pipette慢慢吸上吸下2~3下就好 heatshock时间照老师给的讲义做(有做过４５秒也有做过９０秒) heatshoc完尽速插回冰上 不过要轻轻的= = : 还是plasmid啊 实在想不出什麽原因 plasmid如果是老师给的应该不太可能有问题 : 试剂剂量上都没有问题 涂盘时也确保都有涂乾 玻棒用酒精灯消毒後　可先压plate上过一阵子冷却後再涂盘 避免小菌菌被烫死 : 还会有其它原因吗 麻烦板上的高手解答 涂盘前看有没有离心增加菌的浓度 不过通常是不需要 : 小的是新手 谢谢 这是我实验课的心得m(__ __)m 别鞭太大力 --

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