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标 题Re: [问题] 国外寄来ㄉsample
发信站新绿园 (Mon Apr 10 17:24:02 2006)
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※ 引述《[email protected] (一只小蚂蚁)》之铭言:
> 请教一下:
> 老板丢了一个sample给我,是从国外要来的plasmid,好像是直接点在3M membrane上,
> 我的想法是直接把3M membrane放入tube内,加入65度C加温的水或TE buffer,incubation
> 数小时後,取出跟competent cell mix利用heat shock的方式送入E. coli保存,
> 再利用抗生素筛选抽Plasmid,可是上次的经验是失败了,因为Plate根本没有菌落长出来,
> 证明我elute DNA失败,想请问各位前辈有没从这种paper上elute DNA之经验,可以传授一下
> 吗?
我是直接将membrane剪下来之後,先用50 ul的水(不用加热亦可 )
先把整张浸渍在里面,之後等各五分钟吧,再用12000g离心3-5分钟
把水吸到另一个tube就可以了transform
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