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标 题Re: [问题] 我的plate让我很像cloning菜鸟…
发信站新绿园 (Fri Mar 31 08:50:37 2006)
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※ 引述《[email protected] (其实是水桶腰)》之铭言:
> 做cloning做那麽久了,第一次觉得自己像个什麽都不知道的菜鸟…
> 事情是这样的,我做subcloning,直接拿ligation reaction去transform,
> 用的是DH5a, heat-shock 2 min, recover 50 min,
> 长在LB/ampicillin plate(100 ug/ml)上,
> 过了20小时(是的,有点久…我认错…)去收,
> 结果发现plate上很多colony都一大坨 水水的,
> 以前有一次做TA cloning也这样(那时是16小时去收),
> 不过那次有做蓝白筛选,所以我挑看起来长得像colony的东西去养、去切,
> 6颗里面有4颗是对的…
> 重点是,
> 如果是incubate太久,不是都会有satellite现象吗?
> 这样子"水水的"的现象是什麽造成的?
> 是plate太湿吗?(我在plating之前有在hood开一点点吹个十分钟)
> 感谢版上达人解惑~
> 有图有真相:http://www.wretch.cc/album/blackhottie
我觉得应该是incubate太久了
satellite也长大了
而你要的colony长的太大 部分连在一起 就变水水的
我有时养太久也是这样
不过奇怪的是有时养很久colony长到一定的程度就不太会变大
但有时又长的很大
为何会这样我也不太了解
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如果美丽必须成为过去
别忘了临走时
请将记忆装入行囊
顺便关上曾经为你而开的窗
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