※ 引述《[email protected] (其实是水桶腰)》之铭言： : 昨天我做片SDS-PAGE, seperating gel很快就凝了(约30 min)， : 然後做stacking gel的时候，却死都不凝，做了4次，4次都一样， : 甚至连well底都不凝，但是剩下来放在tube的却全都凝了； : 我怀疑是没有mix好，但是我做的步骤如下： : 加水、acrylamide/bis-acrylamids、tris buffer、SDS : -> vortex, spin down : ->加APS : -> vortex, spin down : ->加TEMED : -> vortex, spin down : 我想应该不是reagent的问题，因为我seperating gel用的都是同样的reagent， : (除了tris buffer> : 而且tube里的都凝了… : 请问版上的大大们有类似经验吗?可能是什麽问题? : APS应该不会在一瞬间坏掉吧… : 以前从来没有过这种经验… 遇到这种状况真的是满无奈的… sample都弄好了…就是胶搞不凝…真是见鬼了！！ 这种时候我就是自认倒楣再做一片，然後加double的aps， 不过我的状况是连剩下留在tube里的胶也不凝耶…後来也确定是aps的问题 10分钟就凝了！通常胶不凝就是aps出问题，aps很难搞 有时候放在室温没冰起来还是很好用 有时候从冰箱拿出来的反而不会凝…(不好意思吐一下苦水…我也被aps搞疯过) 会不会是你在凝胶的过程中有摇晃…如果有动到的话…也是会使胶搞不凝的 还有一个建议是在加入stacking gel前…我会用ddh2o把95% elcohol洗掉 这样stacking 的效果比较好 -- ╭──── Origin:<不良牛牧场> bbs.badcow.com.tw (210.200.247.200)─────╮ │ ↘ Welcome to SimFarm BBS -- From : [140.120.240.165] │ ╰◣◣◢ ◢◢《不良牛免费拨接→电话:40586000→帐号:zoo→密码:zoo》 ◣◣◢ ─╯