作者tonyroro (孤独存在)
看板Biotech
标题Re: [问题] 关於western的电泳小问题
时间Wed Mar 22 23:38:17 2006
※ 引述《jedy (想去南极跟企鹅玩!)》之铭言:
: 其实已经是大问题了
: 因为实验需求 所以跑western
: 跑了三次 但是总是遇到一些瓶颈
: 不知道要怎麽解决 所以上来寻求一些意见
: 我所使用的是全新的bio-rad的电泳和湿式transfer设备
: 但是当我在跑电泳的时候
: 所花的时间很长 5-6小时
: 这跟我以前在做western跑电泳的情形差很多
: 本来以为是Tris buffer或是running buffer的问题
: 因为这些是自己泡的
: 结果这次全部重泡一次的
: 一开始有跑得比较顺
: 但是跑到中间又开始跑不动了
: 而且这几次我发现我的running buffer会从电泳槽会有些漏出来
: (从外槽跟内槽连接的缝隙 不是外槽破掉 我check过了)
: 所以桌子会湿湿的
: 我在猜我的电泳会比较跑不动是不是跟那个running buffer漏出来有关呢
: 我跑的是brain tissue sample
: 利用的SDS-page 为10% resolving gel 5% stacking gel
你里面跟外面buffer的液面有差很吗
有可能从里面露出来 另外桌子湿湿的 是不是你的外槽压克力那个已经破了.....
这样应该很难跑出来ㄅ
有可能里面的液面一直在下降你没注意到 也有可能这样
跑不动
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.203.19.83
1F:推 SUESHIN:如果外槽会漏 全新的怎麽会降捏 03/23 02:42
2F:→ SUESHIN:如果是里面的槽液面降低 那表示你没有装好 03/23 02:42