作者aggaci (好想学钢琴阿!(学陶笛中))
看板Biotech
标题Re: [问题] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
时间Wed Mar 22 13:55:50 2006
※ 引述《chiasaiqueen (其实是水桶腰)》之铭言：
: 昨天我做片SDS-PAGE, seperating gel很快就凝了(约30 min)，
: 然後做stacking gel的时候，却死都不凝，做了4次，4次都一样，
: 甚至连well底都不凝，但是剩下来放在tube的却全都凝了；
: 我怀疑是没有mix好，但是我做的步骤如下：
: 加水、acrylamide/bis-acrylamids、tris buffer、SDS
: -> vortex, spin down
: ->加APS
: -> vortex, spin down
: ->加TEMED
: -> vortex, spin down
: 我想应该不是reagent的问题，因为我seperating gel用的都是同样的reagent，
: (除了tris buffer>
: 而且tube里的都凝了…
: 请问版上的大大们有类似经验吗?可能是什麽问题?
: APS应该不会在一瞬间坏掉吧…
: 以前从来没有过这种经验…
欧
我的作法是TEMED加原来的3~4倍
Stacking那层TEMED加多不会怎样
但是separation那层得照步骤来
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http://0rz.net/da0PG 我的相簿....
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