作者chiasaiqueen (其实是水桶腰)
看板Biotech
标题[问题] SDS-PAGE stacking gel一直不凝
时间Wed Mar 22 02:53:12 2006
昨天我做片SDS-PAGE, seperating gel很快就凝了(约30 min)，
然後做stacking gel的时候，却死都不凝，做了4次，4次都一样，
甚至连well底都不凝，但是剩下来放在tube的却全都凝了；
我怀疑是没有mix好，但是我做的步骤如下：
加水、acrylamide/bis-acrylamids、tris buffer、SDS
-> vortex, spin down
->加APS
-> vortex, spin down
->加TEMED
-> vortex, spin down
我想应该不是reagent的问题，因为我seperating gel用的都是同样的reagent，
(除了tris buffer>
而且tube里的都凝了…
请问版上的大大们有类似经验吗?可能是什麽问题?
APS应该不会在一瞬间坏掉吧…
以前从来没有过这种经验…
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 220.137.91.49
1F：推 cleanbottle:不需要vortex吧...我曾因为用vortex而胶不凝 03/22 03:26
2F：→ cleanbottle:改用倒转tube来mix就没在发生过胶不凝的状况 03/22 03:27
3F：→ cleanbottle:不过你说tube里剩下的都有凝.那可能又跟我的情况不同 03/22 03:29
4F：推 cleanbottle:我是vortex mix後,连tube里的都不凝 03/22 03:32
5F：推 vixen:接触空气会比较慢凝 03/22 04:03
6F：推 wensing:抽真空！试试看！ 03/22 17:08