作者cloud74115 (阿亮)
看板Biotech
标题[问题] pET expression vector的选定
时间Tue Mar 7 19:00:17 2006
之前将我的insert接到pGEX4T1这个vector
定完序列也送到BL21作表现蛋白质
同时也有做空pGEX4T1做control
可是做了很久
一直没有看到我的fusion protein有被表现出来
但是空的pGEX4T1却明显有出来
和老师讨论过後 老师也不知道为什麽会这样
所以後来决定要换套系统是看看
现在想要看pET哪个vector最适合
将insert这个protein纯化出来後
目的要做in vitro binding assay
另外我的蛋白质是膜蛋白
大概是1.6 bp
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.174.98
1F：推 aggaci:连Western blot也看不到吗? 03/07 20:54
2F：推 enisx:induction的条件是如何?? 我有遇过这种情形 那时候是重新做 03/07 22:49
3F：→ enisx:一次 因为 要来的pGEX似乎有问题 03/07 22:51
4F：推 hkaiwei:会不会是protein沉淀了 03/07 23:09
5F：推 ROKEE:case by case la.....我的一个蛋白构了8种表现载体 /_\~ 03/07 23:48