作者enisx (Tuor Oronar)
看板Biotech
标题Re: [问题] 请问EAS
时间Tue Oct 26 19:37:28 2004
※ 引述《lovesb (等待在十字路口  I》之铭言:
: 最近看paper看到一个以flow的原理为基础的实验方法
: EAS: Enzymatic amprification staining
: 可用来amprifyㄧ些表现量低的分子的讯号 以利我们detect
: 但是看了paer中的内文
: 他们是在Ab上接上biotin,再用conjugate PE的streptavidin
: 但是我不太明白这样的过程中是在哪个步骤可以放大讯息呢^^?
: 我找了当初提出这个方法的original paper
: Cytometry 40:81–85 (2000)
: 有看却一整个没有懂阿@@~
: 不知道有没有了解这个实验方法的大大可以解惑呢
: 谢谢呢^^
这篇文章在MATERIALS AND METHODS的部分有提及
他将实验分成两组
一开始将细胞利用biotinylated的单株抗体去辨认
接着分成
1.以传统的方式 用streptavidin conjugated FITC 或PE (orCY3)
(因biotin和streptavidin有很强之结合力) 接着作FACS
2.利用TAS (Tyramide Signal Amplification)的原理
您可参考:
http://www.blossombio.com.tw/Products/TSA.html
or
http://www.blossombio.com.tw/PDF/Products/TSA%20Priciple.pdf
这同样是运用biotin和streptavidin之间的结合力,而streptavidin又能再
和另三个biotin结合,此三个biotin另外各自接上酵素(HRP)
经TAS放大後 再用streptavidin conjugated FITC 或PE (orCY3)
可以得到较好的结果!!
这篇paper是在证明後者比前者好
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.25.191
1F:推 lovesb:谢谢你呢^^ 我研究一下TSA,有问题的话还希 140.112.121.97 10/27
2F:→ lovesb:望能和你多多讨论喔*^_________^* 140.112.121.97 10/27
3F:推 enisx:不客气^^ 140.112.25.191 10/27