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标 题Re: [问题]RNA extraction
发信站中山计中美丽之岛 (Fri Feb 9 00:45:31 2007)
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我认为你老板把RNA想成是DNA的一种吧?
他有没有叫你直接拿DNA polymerase去增殖DNA片段?
我老板就跟我提议过这种事,不管我怎麽解释,
他就是不认为DNA与RNA不同。能不能偷偷回信到我信箱,告诉我你老板
是哪一位?会不会是我认识的?
> ==> [email protected] (台北.哪有很优的发型设计) 的文章中提到:
> 各位前辈大大您们好
> 之前实验室都是专门做关於E. coli与yeastDNA以及蛋白质表现方面.
> 但是突然老师要我做抽取RNA来做PCR
> 目前面临问题是.因为实验室里学长姊没做过RNA相关实验.
> 老师也不是很清楚.问东问西找资料然後叫我找资料跟他讨论
> 讨论之後老师他本人解释很怪很疑惑也很不确定.所以想请问有过RNA的前辈解惑
> 我想问的问题是:
> 1.实验室没专门做RNA的实验桌及仪器(ex.离心机).老师跟我说用水擦一擦再用70 %ETO
H
> 清理过就可以操作RNA实验.这样的做法可行与否?
> 2.关於Tip,实验室没有新的tip盒,只有旧的.老师叫我把他一样用水跟酒精交互清洗.
> 就可以插tip去灭菌.赃赃的tip盒用这样处理方式可以把RNase除去吗?(实验室的Tip
> 是没有棉花滤膜那一种)
> 3.关於pipette,老师也是叫我用水跟酒精交互擦拭做初步清洁,但我是想问用很久的
> pipette内部空腔不是都赃赃的容易污染?要怎麽清理内部减少RNase污染?用棉花
> 棒清在直接高压高温灭菌?
> 4.操作过程中所使用的药品,是不是都需要在RNase-Free场所配置?配置药品所需用到水
> 应该是拿DEPC-ddw吧?老师是跟我说像是phenol/chloroform拿抽DNA的那个来用就可ꔊH,
> 这样ok吗?
> 5.老师叫我用bead及acid phenol来做RNA extraction,那bead要怎麽处理去污染阿?
> 用来装的eppendorf要怎麽做预处理去除RNase?是直接灭菌??
> 6.实验过程中可能会碰到冰箱跟离心机,我戴手套然後再碰这两个器材会不会因为其
> 他人没戴手套就这样把RNase附着到手套上面进而污染我的东西?(实验室没专门用
> RNA的冰箱,离心机以及场所)
> 目前我只想到一些疑问,请各位前辈不令指教 谢谢
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* Origin: 中山大学-美丽之岛BBS * From: 220.129.10.219
1F:推 youshould:会不会太夸张..RNA/DNA分不清楚 219.68.99.16 02/10 21:15