※ 引述《jay0404 (yuga)》之铭言： : 小弟想请问一下有关subclone有哪几种方法 : 我目前知道的有 : 1.用enzyme将不需要部分去除再重新与vector ligation : 2.还有用PCR将需要的insert夹出来在与vector ligation : 这两种方法想请问一下还有其他方法吗?? 现在有 gateway system 使用 DNA reconbination 的方法， 将某个片段 (两端有特定的序列以供互换) 从一个 vector 换到另一个 vector 这应该是 Invitrogen 公司发展出来的 http://www.invitrogen.com/content.cfm?pageid=4072 他有一些限制：首先，target vector 也必须带有相同的互换序列 生技公司会卖一些已经常用的 target vector 是带有这些序列的 例如 GST vector, GFP vector 等等， 当然也有 TA cloning vector (by the way, TA cloning 现在也有改用 TOPO vector 的技术，也是和互换原理有关) 等到接到 T-vector 後就可以用互换的方式 subclone 到 target vector 整个过程不需要用到 restriction enzyme 不过能 subclone 的 vector 有限就是了 -- ~因为生活已经太复杂了 所以就让我们的爱情单纯吧~ --

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