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标 题Re: [问题] 关於western的电泳小问题
发信站I-Shou University BBS (Thu Mar 23 23:44:50 2006)
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※ 引述《[email protected] (想去南极跟企鹅玩!)》之铭言：
> 其实已经是大问题了
> 因为实验需求 所以跑western
> 跑了三次 但是总是遇到一些瓶颈
> 不知道要怎麽解决 所以上来寻求一些意见
> 我所使用的是全新的bio-rad的电泳和湿式transfer设备
> 但是当我在跑电泳的时候
> 所花的时间很长 5-6小时
> 这跟我以前在做western跑电泳的情形差很多
> 本来以为是Tris buffer或是running buffer的问题
> 因为这些是自己泡的
> 结果这次全部重泡一次的
> 一开始有跑得比较顺
> 但是跑到中间又开始跑不动了
> 而且这几次我发现我的running buffer会从电泳槽会有些漏出来
> （从外槽跟内槽连接的缝隙 不是外槽破掉 我check过了)
> 所以桌子会湿湿的
> 我在猜我的电泳会比较跑不动是不是跟那个running buffer漏出来有关呢
> 我跑的是brain tissue sample
> 利用的SDS-page 为10% resolving gel 5% stacking gel
我做过hofer的,後来做bio-rad
跑不动,我觉得很奇怪,结果
0m1;1m玻璃片装反了0m
orz 因为hofer跟bio-rad的玻璃片装法是相反的
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