作者konnankonnan (天使海豚)
看板BioMedInfo
标题[讨论] 求救-关於小鼠关节组织的"脱钙"处理
时间Tue Nov 27 10:50:10 2012
小弟目前在做小鼠关节炎相关的研究, 需要取下小鼠发炎的关节组织,
然後进行组织切片, 然後再做免疫组织学染色 (IHC)
但是小鼠的关节组织中, 因为有硬骨, 所以没办法直接做组织切片, 需要先经过脱钙处理
我看书上写, 脱钙处理的方法有两种, 一种是浸泡酸性拖钙液...另一种是浸泡 EDTA
因为我之要是要做 IHC, 所以不能用酸性拖钙液, 因为担心抗原会坏掉, 所以只能用 EDTA
可是我将小鼠的关节组织去除皮毛後, 浸泡在 10% EDTA 中, 1个月 (正常泡一星期)
结果小鼠的关节还是很硬...几乎没有脱掉钙...
我的 EDTA 溶液是用水去制备....泡 EDTA 的时候, 是放在冰箱里面 (因为 1 个月)
不知道各位大大们, 有没有什麽建议....因为真的很需要这个 data...
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◆ From: 122.146.177.66
1F：→ Nofetete:我的SDrat用的是14%的EDTA(pH7.4)，你有调pH值吗？ 11/29 14:08
2F：→ Nofetete:还是你的泡太久pH值跑掉?那就要换新的喔 11/29 14:09
3F：→ Nofetete:我记得EDTA里面钙离子如果饱和的话，pH值会跑到9之类的 11/29 14:50