作者KSfish (不下棋 勿擾)
看板NCHU-PP87
標題丁香、甘草、迷迭香的抑菌作用
時間Tue Mar 6 21:36:46 2007
http://72.14.235.104/search?q=cache:uPoagJUwCoMJ:www.spbl.com.cn/forum_view.asp%3Fforum_id%3D5%26view_id%3D12385+%E7%B2%BE%E6%B2%B9%E6%8A%91%E8%8F%8C%E5%88%86%E6%9E%90&hl=zh-TW&ct=clnk&cd=71&gl=tw
丁香為桃金娘科植物丁香的花蕾,具有抗菌、消炎、抗病毒等功效,其揮發油中主要含
有丁香油酚、乙?丁香油酚、β-石竹烯以及甲基正戊基酮、水楊酸甲酯等。甘草為豆科
植物甘草的根和莖,多年生草本植物,是我國傳統中藥,具有解毒、抗炎、抗腫瘤和抑菌
作用,其中藥用的有效成分為甘草酸、甘草次酸和多種黃酮成分。迷迭香為唇形科迷迭香
屬植物,常綠灌木,具有抗氧化、抗病毒、抗腫瘤及抑菌等作用,其主要有效成分為二?
酚類、黃酮類及三?類等。丁香和甘草是衛生部公佈的藥食兼用材料,而迷迭香作為中藥
材和天然香料植物也應用在化妝品、食品和藥品中,均可用於食品防腐。筆者從丁香、甘
草、迷迭香等藥食兼用植物中提取防腐抑菌物質,研究其對食品常見污染菌的抑菌作用,
並應用於醬油保藏,以取代化學製品苯甲酸鈉,同時也賦予醬油以特殊香味。
原材料
迷迭香,丁香、甘草。
試劑
95%乙醇(食用)、丙三醇(AR)。
菌種
細菌:金黃色葡萄球菌(簡寫S);大腸桿菌(簡寫E);昌芽孢桿菌(簡寫B)。
黴菌:黑曲霉(簡寫A);青霉(簡寫P)。
酵母菌:漢遜氏酵母菌(簡寫H)。
培養基
細菌培養基:蛋白?1%、NaCl0.5%、牛肉膏0.3%、瓊脂2%,滅菌前pH7.2—7.
6。
黴菌及酵母菌培養基:酵母膏1%、蛋白?15、葡萄糖2%、瓊脂25,自然pH。
儀器
植物粉碎機、索氏抽提器、旋轉蒸發器、壓力蒸汽滅菌鍋、恆溫培養箱。
丁香、迷迭香及甘草中所具有抑菌作用的生物代謝物主要有揮發油(精油)?、生物
鹼、鞣質等,這些物質均可溶於醇中。筆者研究的是提取各種抑菌物質的混合物,考慮到
食品安全性,均用食用乙醇提取,並對固化液、提取時間、提取溫度進行選擇試驗。提取
方法如下。
原料清洗→粉碎→食用乙醇浸泡→索氏抽提器抽提→旋轉蒸發器濃縮去殘留乙醇→防
腐劑原液
防腐劑原液定義:1mL提取液含1g原材料的提取物(1g/1ml)。防腐劑原液抑菌效力
的測定—濾紙片擴散法
分別吸取經活化並選擇好菌液濃度的各試驗菌於已制備好的平皿培養基中,每個平皿
放3片浸過防腐劑原液並經乾燥的濾紙片,用無菌水和醇提取空白液作對照,分別記為CK1
、CK2,細菌經37℃、24h,黴菌和酵母菌經29℃、24h恆溫培養。每個菌種3組培養皿,量
取抑菌圈直徑,取平均值。
最低抑菌濃度(MIC)的測定—用平板擴散法
分別將各原液用丙三醇倍比稀釋,加入培養基中,用平板劃線法接種,同上條件培養
,以無菌水、空白提取液及提取物稀釋劑丙三醇作對照,分別記為CK1、CK2、CK3。完全
沒有菌生長的最低提取物濃度為最低抑菌濃度(MIC),空白同上。
活性pH範圍測定
分別調節各培養基pH為4、5、6、7、8,用比提取物MIC低一個濃度梯度提取液進行測
定,方法同MIC測定,以水作對照,比較各pH下試驗菌生長情況,確定出活性pH範圍。
防腐劑原液熱穩定性的測定將防腐劑原液分別置於80℃、100℃、121℃濕熱條件下,
熱處理15min後加入培養基,其餘操作同MIC測定,觀察其抑菌作用的熱穩定性。天然防腐
劑在醬油中的應用試驗醬油是人們喜愛的調味品,按照國家標準,可加入化學防腐劑苯甲
酸鈉防腐,加入量為0.5g/kg—1.0g/kg,一般在生醬油加熱(65℃—75℃)殺菌工序
中添加。本應用試驗是將提取的天然防腐劑加入到生醬油中以取代苯甲酸鈉防腐,分別存
放3個月、12個月後檢測其衛生指標,以觀察其防腐效果。結果如下:
丁香和迷迭香對所選試驗菌均有較強的抑製作用,而甘草除黑曲霉外,對其他所選試
驗菌亦有一定的抑製作用。
丁香對金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度(MIC)為3.125mg/ml,對大腸桿菌、枯草
芽孢桿菌為6.25mg/ml,對漢遜氏酵母菌、黑曲霉及青霉等均為25mg/ml。甘草對金黃
色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌MIC分別為3.125mg/ml和6.25mg/ml,對漢遜氏酵母菌及青
霉MIC均為12.5mg/ml,對大腸桿菌則為50mg/ml。迷迭香對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌
的MIC為6.25mg/ml,對其他試驗菌為12.5mg/ml。
丁香的抑菌活性pH範圍為4—6,甘草和迷迭香的活性pH範圍為4—7。
丁香和迷迭香熱穩定性強,在100℃下是穩定的,而甘草則在80℃以下是穩定的。
3種不同材料提取物組合配伍後的天然防腐劑可適用於醬油中抑菌防腐,完全可取代
化學合成防腐劑苯甲酸鈉。
綜上所述,丁香的抑菌譜寬,對細菌、黴菌及酵母菌均有較強的抑制力(抑菌圈直徑
11mm—25mm),最低抑菌濃度(MIC)較低(3.125mg/ml—6.25mg/ml),熱穩定性好
(100℃以內穩定),活性pH較寬(pH4—6)。迷迭香與丁香各種性能相似,各指標略低
一些。但據多個學者報道,迷迭香有較強的抗氧化性。甘草對細菌的抑制力特強,在溫度
低於80℃環境中是穩定的,故選用上述3種材料提取的抑菌物質經配合後用於醬油防腐,
達到了很好的抑菌效果,同時防腐劑也賦予了醬油一種特殊的香味。
由於苯甲酸鈉是一種酸性防腐劑,當pH>4時,防腐抑菌效力大大降低,而該天然防
腐劑活性pH範圍在pH4—6之間,故在醬油及pH中性偏酸的介質中,該天然防腐劑的抑菌效
力優於苯甲酸鈉。
丁香和甘草是衛生部批准使用的藥食兼用材料,迷迭香是應用於食品和藥品中的中藥
材和化妝品中的香料,均安全可靠。
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