作者u2721 (公車雅濕娜)
看板Chemistry
標題[實驗] HPLC流動相對管柱之影響
時間Thu Nov 15 10:49:29 2018
大家好
小弟我使用HPLC分析para-chlorobenzoic acid (pCBA)，採用40:60(MeOH:10mM phosphate)的流動相配比，
流速為0.6 L/min，採樣體積為60uL，管柱屬於C18 reverse phase，
最近常出現shoulder或是tailing，新來的管柱沒有這樣的問題，但是大概分析兩三週就開始出現這種現象，
管柱壽命有點太短。
目前懷疑是流動相配比40:60(10mM phosphate佔60%)的問題，只知道C18不能跑100%水，
想請問各位大大，60%的10mM磷酸會讓管柱在兩三週內直接掛掉嗎?
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.45.59
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Chemistry/M.1542250174.A.7C3.html
※ 編輯: u2721 (140.112.45.59), 11/15/2018 10:53:41
1F：→ tony15899: 你有洗管柱嗎? 11/15 11:26
2F：→ jerry9437: 樣品體積太大？ 11/15 12:45
3F：→ ghjkl5566: 流速0.6L/min的管柱很大,樣品60uL應該是小意思 11/16 13:03
4F：→ ghjkl5566: 磷酸0.1%也蠻正常的,管柱不該這麼快老化,大概就沒洗乾 11/16 13:05
5F：→ ghjkl5566: 淨吧 11/16 13:05
6F：推 david00676: 管住沒洗乾淨吧... 11/16 13:10
7F：推 encoreg10917: 跑完要洗 column 啊，低流速0.4~0.5 ;MeOH/H2O = 11/18 14:11
8F：→ encoreg10917: 10/90跑 30 分鐘，再換 MeOH/H2O = 35/65 跑 30 分 11/18 14:11
9F：→ encoreg10917: 鐘; 再用 65/35 跑30 分鐘，最後用保存column 的比 11/18 14:11
10F：→ encoreg10917: 例濃度跑30~60分鐘，儲存在特定比例的溶液中(ex: 11/18 14:11
11F：→ encoreg10917: 100% MeOH 或 70% 以上有機溶液中，依column 而異 11/18 14:11
12F：→ encoreg10917: );鹽類溶液系統中，如果column 在待命也不可以停流 11/18 14:11
13F：→ encoreg10917: 速，但可降流速。 11/18 14:11
14F：→ HPLC: 0.6 L/min，每分鐘600 mL... 11/18 17:05
15F：推 HPLC: 跑完有用水洗過整個系統嗎？鹽類跑完都要有這動作，以前跑 11/18 17:08
16F：→ HPLC: 鹽類我都頭痛。 11/18 17:08
17F：→ ghjkl5566: 每分鐘600mL其實還好,義美有可以跑到1L以上的管柱 11/19 12:56