作者a1508 (ardor)
看板Chemistry
標題[學科] HPLC-DAD與質譜儀定量問題
時間Mon Jan 22 14:02:55 2018
https://i.imgur.com/HQWSNCI.jpg
從table可以看到 都是用Standard curve的標準曲線進行定量 為什麼LC/DAD的定量效果比LC/MS/MS還好
就結果論來說 LC/MS/MS是後兩者定量方法是比較準確的 基質效應的原因我還能理解 但是Standard curve卻是不好的
這個問題困惱我一陣子了 謝謝各位
第一次po文 請見諒
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1F：推 jeff79723: 這張表格感覺就是說有基質效應，後兩種方法都是可以改 01/22 21:58
這樣解釋是合理的 但是利用HPLC-DAD卻沒有基質的影響 就是我困惱的電
2F：→ jeff79723: 善基質效應的方法。standard curve會有基質效應(樣品濃 01/22 21:59
3F：→ jeff79723: 品濃度偏低，即可看出)主因是標準品(standard curve) 01/22 22:00
4F：→ jeff79723: 沒有基質造成無法反應基質對於訊號的影響。 01/22 22:01
5F：→ a1508: 因為沒有基質的影響 標準品在純buffer中的訊號不應該比較高 01/23 10:28
6F：→ a1508: 嗎？ 01/23 10:28
※ 編輯: a1508 (111.83.162.168), 01/23/2018 14:05:55
7F：→ tony15899: DAD特定波長是對化合物有選擇性的偵測 01/23 14:41
DAD是這樣沒錯 但是LC-MS/MS 利用標準品拉標準曲線（溶在丙酮） 因此不會受到基質的影響 但是定量的結果是比較差的
8F：→ tony15899: 該波長沒有吸收的物質就不出峰 干擾小很多 01/23 14:42
9F：→ tony15899: 基質干擾也不一定是減少訊號強度 01/23 14:47
※ 編輯: a1508 (111.83.162.168), 01/23/2018 15:58:52
10F：→ a1508: 補充一下我的疑問點 DAD的部分已經了解了 謝謝各位 01/23 16:22
11F：→ a1508: 一個是用 standard curve拉的標準曲線 01/23 16:22
12F：→ a1508: 一個是用 standard addition method 拉的標準曲線 01/23 16:22
13F：→ a1508: 從結果來說 真實樣品帶入 standard curve是比較差的 01/23 16:22
14F：→ a1508: 帶入 standard addition method卻是比較好的 01/23 16:22
15F：→ a1508: 單純只是因為基質效應問題嗎？ 01/23 16:22
16F：→ tony15899: 標準曲線本身沒問題 但是樣品有基質干擾 01/23 17:01
17F：→ tony15899: 那標準曲線當然就不適用 01/23 17:01
18F：→ tony15899: 就圖來看,基質干擾可能使樣品中的待測物訊號強度降低 01/23 17:02
19F：→ tony15899: 標準添加是加到樣品裡面 理論上較佳 01/23 17:07
20F：推 jeff79723: standard addition method 通常被用來確認基質效應 01/23 20:30
21F：→ jeff79723: LC/MS/MS一般認為選擇性很好，但是質譜中樣品transfer 01/23 20:30
22F：→ jeff79723: 的動作很多，每個步驟(離子化等)都可能因為樣品基質造 01/23 20:31
23F：→ jeff79723: 成基質干擾。 01/23 20:34
24F：推 jeff79723: 其實對於基質干擾...我也有疑問。是否只能從經驗/實驗 01/23 20:37
25F：→ jeff79723: 得知/判斷。有辦法看到樣品就預先知道可能會有基質干擾 01/23 20:37
26F：→ jeff79723: 嗎?XDDD 01/23 20:37
27F：→ tony15899: 所以樣品前處理很重要 但還是有一堆paper在那邊 01/23 20:49
28F：→ tony15899: 我有MS我用SIM就不用前處理好棒棒 01/23 20:50
29F：→ a1508: 謝謝tony與jeff的回答！ 01/24 10:47