作者scy2468 (scy)
看板Chemistry
標題[實驗] HPLC column accucore aQ保養
時間Tue Apr 26 11:11:21 2016
各位高手好，有問題請教
實驗前有先用 水/甲醇(50%50%)condition一個小時
實驗後也用水跟甲醇以緩慢流速梯度清洗一個多小時
但是這隻卡冷已經是第二支了
卡冷五個月就死一支
(規格:100*2.1mm 2.6um)
已經觀察幾個地方
一.壓力與以往相同。
二.溶劑為單純甲醇及5mM醋酸銨水溶液(配完有震盪過)，都為新鮮現配。
三.條件沒有改變過(LC分析溫度30度)。
四.樣品前處理有用2um孔徑過濾器過濾，樣品是乾淨的水。
五.最終保純是在水/甲醇(10%/90%)，平日最長放置14天沒有使用。
目前發現問題:
分析物(較親水的)滯留時間會改變，提前流出，而且時而正常時而不正常。
正常時分析物的感度訊號良好與以往同
不正常時根本無法定位分析物位置...
還請各位高手提點教導
是否有該注意的地方遺漏了
小的愚鈍Q_Q
謝謝!!
__________________________持續更新中
對了，我的流速都設定在0.25ml/min
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※ 編輯: scy2468 (111.83.146.241), 04/26/2016 11:13:34
1F：→ tony15899: 層析梯度最後有設平衡時間嗎?04/26 12:29
2F：→ scy2468: 有耶 最後甲醇平衡10分鐘04/26 14:32
※ 編輯: scy2468 (111.83.207.78), 04/26/2016 14:33:57
3F：→ tony15899: 我是說平衡回你方法初始流洗夜比例的時間 04/26 18:26
4F：→ scy2468: 啊好像沒有欸，可是我會先打四隻BK讓他跑完再跑樣品 04/26 21:33
5F：→ scy2468: 之前結果也很正常，會不會卡冷壞了 04/27 13:40