作者mary0829 (cacciachou)
看板Chemistry
標題[實驗] HPLC打出來的圖問題
時間Mon Mar 30 17:35:03 2015
各位大大們 我是剛進這深坑的菜鳥!
我在做HPLC時
打出來的圖如下
ppt.cc/eKFe
使用的管柱 spolar C18(4.6mmID*250mm),MP: acetonitrile(0.1%):acetic acid=25:75
流速 0.5ml/min , 檢測波長 320nm 用.22過濾 用乙晴當solvent
發現很奇怪的圖 baseline是向下斜,然後出現很奇怪類似peak,卻發現值是負的
BY 被老闆追殺到死沒人可以救的菜鳥
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→ o810418: 先猜這是RID的?
RID是指....? 你說的是那台RI DEC掃出來的嗎? 我們那台壞掉不知道學長他們怎麼弄得 他們說是可以測的 03/30 23:37
推 thewaterboy: 有空針可以比較嗎? 打一隻看看
空針是指不要添加物質直接用solvent打嗎? 03/30 23:48
1F：推 tony15899: 你確定流洗液比例有75%是醋酸? 03/31 00:30
2F：→ tony15899: 偵測器剛開機時需要時間穩定 大概0.5-1小時讓它跑 03/31 00:32
我看paper是這樣做,開機我有先讓他跑2小時達穩定,但是打下去就變成這樣了,而且打下去之後壓力會暴增3倍
3F：→ htp: 最簡單的方式就是重複打三到五針，確認基線穩定與再現性 03/31 09:21
你是說樣品打兩三針看看嗎?
感謝你們幫我解答!
※ 編輯: mary0829 (140.124.52.70), 03/31/2015 09:57:37
※ 編輯: mary0829 (140.124.52.70), 03/31/2015 10:02:53
※ 編輯: mary0829 (140.124.52.70), 03/31/2015 13:55:52
4F：→ tony15899: 75%是醋酸 還是75%的水含0.1%醋酸 這2個差很大 03/31 19:22
5F：→ tony15899: 如果你人還忍受的住的話應該是後者= = 03/31 19:22
6F：→ tony15899: 壓力暴增是指pump開啟狀態，進樣前後的差異? 03/31 19:24
7F：→ fongn: 壓力暴增 該不會塞管了XD 03/31 20:34
8F：→ i19890813: 1. 樣品濃度太低? 2. 管柱平衡未完成 是UV detctor? 04/01 01:21
9F：→ i19890813: 可以打不含樣品的ACN 確認基線平穩了之後再打樣品 04/01 01:22
10F：→ HPLC: 有樣品？ 等梯度？ 04/03 19:59