作者shiaobau (木人)
看板Chemistry
標題Re: [實驗] 關於層析管柱相關問題
時間Thu Aug 6 08:49:38 2009
※ 引述《kinkilon (許我一個堂本剛吧!)》之銘言:
: 最近在看paper...
: 有看到幾種不同類型的層析管柱以及裡面填充的料...
: 以下是我在PAPER上看到的東西:
: 1. Cosmosil 75C18-OPN
^^^
沒用過,看型號是逆相層析用的填料
如果是的話,它是極性篩,依極性大小分離化合物
適用較高極性的化合物(polar)
印象中這類填充料都較貴,需重覆使用
注意移動相不要用低極性的,膠會部份溶出
所以跑的sample極性也不要太低,以最低移動相能溶為主
: 2. silica gel 60 (70-230 mesh)
最常見的膠,便宜,好用
這個是中等mesh的,另有細的 230-400 粗的35-70等等
所謂mesh就是我們常說的目數
70-230就是最大70mesh,最小230mesh
會過70mesh的篩網,不會過230mesh的
粒徑大小介於這之間,其餘類推
這也是極性篩,適用中低極性化合物
移動相極性不可太高,會將膠體溶出
因較便宜,所以用一次就丟棄
常以n-hex 填柱,乾式上柱
: 3. Diaion HP-20
這是日本三菱公司出品的
對岸常稱大孔樹脂,是離子交換型
常用方法為是使用適當的移動相讓sample通過
使部分化合物吸附在樹脂上
再用另種移動相將它洗下
通常可再生後再使用
記得報價大約每升1000-2000 NTD(有分裝過的價錢,原廠較便宜,但大包裝)
: 4.Sephadex LH-20
常用的分子篩,但也能做極性篩使用
以分子篩為用的話,常只用一種移動相來跑
大分子會較快出來,小分子較慢
做極性篩則會改變移動相,逆相跑法
不能用太低極性的溶劑,膠會壞
一定是重覆使用,除非您待的實驗室非常有錢
記得一罐500g,以前買好像是5萬
以甲醇或二氯甲烷等填柱,濕式上柱
: 我只知道其中3.是屬於離子交換~
: 4.則是可依分子大小來純化樣品的東西~~那它是可以分離多大的分子量的呢??是1500嗎?
: 然後1.它是屬於何種特性的填充料??一樣是離子交換嗎??
分離多大分子量,印象中沒特別寫
但注意sample不要太髒,以前做天然物
都會先用si-gel通一次flash column
再用LH-20跑,不然一下去卡髒,前面一小段要棄去,會心痛..
印象中它是葡聚糖凝膠,原理是每一個球中間有很多小孔洞
大分子進不去小孔洞,會從旁邊流過,所以速度快
小分子會通過小孔洞,跑的路徑較大,速度較慢
: 2.後面的(70-230 mesh)他是什麼用意啊??是網住介於70~230分子量大小的東西嗎??
如上所說,那是目數,與粒徑相關,
用越粗的,packing起來的管柱間隙越大
理論上全開流速較快,但分離效果較差
越細則相反,但也與packing技術有關
: 因為我想要照著PAPER上所說的步驟下去做實驗...
: 雖然說PAPER上寫的一定不完整....但是我還是想要搞懂它....
: 因為之後我要找其他的替代品來代替上面這些東西.....所以想要知道他們的特性...
: 我有請辜狗大師幫我的忙....可是找到的東西真的有限...@@"
: 不知道有哪位大大可以幫我的忙~~~
這些東西,色層分析相關的課應該有吧.@@.
加修個實驗課,應該會有用到
貴的可能只會讓你們看一下,
像si-gel應該都會讓你們packing看看
附帶一提,取gel時最好都要戴口罩.
有些gel不會或不易被分解,吸多了會變矽肺病
一些淺見,如果有說錯再請其他大大指教
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.33.236.174
1F:推 comt:寫的真詳細~收穫良多 08/06 10:12
※ 編輯: shiaobau 來自: 114.33.236.174 (08/06 14:40)
2F:推 kinkilon:寫的真的超詳細的啦~~~真的是非常感謝捏~~ 08/06 19:11
3F:→ kinkilon:因為本身是食品營養的~以前上課頂多只有修到儀器分析~ 08/06 19:16
4F:→ kinkilon:我是上班之後才開始接觸這方面的東西~~~真是受益良多壓~ 08/06 19:17