作者ilovesea (結束了!:D樣)
看板Chemistry
標題[實驗] HPLC分離糖類
時間Tue Dec 30 21:58:48 2008
不曉得可不可以在這裡問
希望有大大可以幫我解答@@
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最近要做海藻糖跟麥芽糖的樣品分析
所以要先試條件 找到方法可以把它們分離 peak比較完整
原本用學姐先前實驗的條件
沒想到分不太開 column中間有被拿去做過結構鑑定(詳細不清楚)
所以原本學姐的條件沒辦法分離
後來我用一開始的極性降流速(80% 1ml/min→0.5ml/min)
來打混合樣品 結果有出現兩個峰了!
結果流速再降 一樣是這樣 面積變寬
因此我想說改極性
就把極性降低 改成75%
用1ml/min 打 有出現小小的雙峰
再改成0.5ml/min 一樣 就是面積比較寬的雙峰
可是沒有比較分離的樣子@@
有什麼辦法可以分離開一點呢?
極性再降? 或是是column的問題?
海藻糖跟麥芽糖一樣都是雙醣(都由兩分子葡萄糖構成)
但海藻糖是1,1鍵結 非還原糖
麥芽糖是1,4鍵結
極性感覺差不多的@@
對了~ 單獨跑兩個糖的時候 是麥芽糖較海藻糖先出來
先謝謝大家了^^
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◆ From: 140.120.104.77
1F：→ Chopper:gradient elution? 12/30 23:56
2F：→ ilovesea:我的mobile phase只有用acetonitrile耶@@ 12/31 13:20
3F：→ ilovesea:或是應該用兩種極性來分呢? 12/31 13:20
4F：推 Chopper:維持一定的k値(有較明顯PEAK的)，在調整mobile phase組成 01/01 20:04
5F：→ Chopper:試看看。 01/01 20:04
6F：→ ilovesea:感謝^^ 01/02 09:30