作者ChallengerII (活老百姓)
看板Chemistry
標題Re: [問題] 分析物濃度愈濃,螢光強度愈強,why?
時間Sun Oct 19 08:46:53 2008
※ 引述《ghdl0227 ()》之銘言:
: 各位大大好,我的問題如下:
: 1.根據skoog的儀分課本(6th.p407)濃度對螢光強度的效應最後面所言,自我吸收
: 和自我消光都會使得螢光強度對濃度的做圖呈現ㄧ個極大值,所以我認為濃度
: 愈強螢光強度愈強,是因為產生了自我吸收和自我消光所致,請問此判斷正確嗎?
應該說
螢光分子濃度愈大 遇光被激發的分子數愈多
螢光強度會變強
但是濃度太高的時候 會有自我吸收的狀況
也就是因為分子間距離較近
溶液表面螢光分子激發所放出的光會被周圍的螢光分子吸收
降低螢光強度
所以在較高濃度的狀況並不能直接判斷濃度愈高螢光強度愈強!
這樣出來的螢光光譜會被distort 因為放出的螢光被自己人吸掉了
: 2.我知道,自我消光是因為分子間碰撞的結果,且隨濃度的增加而增加(書上寫的),
: 但是這與螢光強度變強有何關係?而且都已經自我"消光"了,何來增強螢光強度可言?
沒有關係
: 3.而根據skoog的儀分課本(6th.p408)說:<自我吸收是因為當發射的波長與吸收峰
: 重疊時就會產生;當發射光束穿過溶液而且被其他螢光分子再吸收時,螢光就會減
: 弱。>
這意思是說
這種self absorption會發生在螢光分子emission和absorption重疊的時候
有機的dye通常吸收和放射光譜都很寬 多少都會有重疊
除非是遇到stoke's shift超大的dye
: 請問這兩句話有什麼關聯嗎?又如果我第1點判斷正確,那此句話<當發射光束
: 穿過溶液而且被其他螢光分子再吸收時,螢光就會減弱>,是因為自我吸收造成的嗎?
: 如果是,那螢光都減弱了,又何來增強螢光強度可言?
: 真是抱歉問題有點多,這是因為儀分實驗做cyclodextrins經超分子化學作用去吸收
: 鈉螢光分子,而助教問我們cyclodextrins濃度愈高,螢光強度愈強的原因為何,所
: 以才去查書,而書上寫的又很模糊,我也查過網站,但是都沒有滿以的答案,故特
: 前來請教,希望各位大大可以幫忙一下,謝謝!
cyclodextrins結構很有趣
它有一個hydrophobic pocket 外圍則是hydrophilic
其本身不發螢光 所以螢光來源在於所謂的鈉螢光分子
我猜該螢光分子應該是solvent sensitive的dye
在沒加cyclodextrins的時候 螢光分子周圍環境是高極性的水
螢光強度很低(這是solvent sensitive的dye特性)
但是加入cyclodextrins後 該螢光分子被包在cyclodextrins的hydrophobic pocket裡
螢光分子周圍環境極性變低 螢光強度變高
如果對這方面有興趣的話
Lakowicz的Principles of Fluorescence Spectroscopy會有這方面的資訊
不然就是直接翻原始期刊文獻 應該會有解釋
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