我先把文字檔PO上來 另外再上傳醫學系93級的生化檔案櫃 (黃志揚老師P44~P49) 禮拜二普社考試會補發給大家 剩下的會放在系櫃 沒有考普社的同學就請其他人幫忙拿一下 造成大家的不便 不好意思 P.44&45&46 DNA的雙股螺旋結構 1. 1953年由華生與克立克發表DNA的雙股螺旋結構(B form)。 2. 後代用X-ray繞射證明出DNA有A、B、C、D、E、Z六種形式，其中Z form是最矮最胖的。 3. 寬度為20A。；一個turn為34A。，含有10個鹼基對(base pair=bp)。 4. 一個turn裡包含一個小凹槽和一個大凹槽，目的是讓特定蛋白質(轉錄因子)可以插入 ，進而將雙股的DNA拉開。 5. A＝T以二氫鍵鍵結，C≡G以三氫鍵鍵結，故C≡G鍵結為A＝T鍵結強度的1.5倍。此種生 理意義在於：A＝T鍵結較弱，轉錄因子可從A＝T較多的地方把DNA拉開。 6. 含有兩股，分別是5'→3'、3'→5'，稱為反平行。 DNA的Denaturation 1. 要將DNA的雙股分開，首先要先經過加溫的步驟。而讓DNA熔解到一半的溫度，稱為 melting temperature，簡寫為Tm。 2. C≡G多的DNA比A＝T多的DNA需要更高的溫度，因為C≡G含有三氫鍵。 3. Tm的大小決定於兩因素：鹼基的組成與鹽的濃度。 4. 鹽的濃度越高，所需濃度也越高，原因在於鹽溶液中的Na+、K+會吸附在鹼基的周圍， 而讓鹼基較穩定。通常鹽濃度增加10倍，Tm要增加16.6。C。 5. Denaturation的步驟 ○1降低鹽濃度、增加Tm→DNA熔解→ ○2鹼基暴露→ ○3雙鍵吸收光線(hyperchremicity高吸光性)→ ○4失去黏稠性 6. B form的旋轉方式為向右後方旋轉(逆時鐘)，稱為negative supercoil(負超螺旋)。 將來需透過isomerase(拓樸?)才能將其拉開。 p.47&48&49 DNA的複製 1. 雙股都是模板股，並且都以3'→5'為template，從5'→3'合成新股。 2. 半保留型複製。 3. 複製的時候，從A＝T含量多的地方拉開。不同的基因，其拉開的位置不一樣，序列也 不同；但相同的是，都富含A＝T。 4. 圖37-5為半保留型複製的證明。圖中黑色曲線為14N，白色曲線為15N。 (1)用含有14N的培養基培養大腸桿菌，細菌在此培養基中繁殖很多代之後，其DNA所含的 N皆為14N。 (2)將這種細菌放在含有15N的培養基上，經過第一次分裂，其第一子代的DNA中含有 一半的14N一半的15N。 (3)再經過第二次分裂，有一半的第二子代的DNA都是含15N；而另一半的第二子代，其 DNA的一股含14N，另一股則含15N。 DNA複製與轉錄的比較 DNA複製 轉錄 使用的核?酸 dATP、dTTP、dCTP、aGTP ATP、UTP、CTP、GTP Template strand 兩股皆可當模板股 3'→5' Coding strand 無 5'→3' 核?酸的比例 A=T、C=G，A/T=1、C/G=1 A≠T、C≠G，A/T≠1、C/G≠1 DNA與RNA的比較 DNA RNA 五碳糖種類 去氧核糖 核糖 鹼基組成 A、T、C、G A、U、C、G Strand的數目 雙股 單股(但RNA仍有部分形成內部雙股的情形) A/T，C/G比例 A/T=1，C/G=1 A/T≠1、C/G≠1 特性 僵硬、黏稠 遇酸易水解 BY 乙班生化學藝 志鈞 --

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