作者hi1214514 (HI)
看板Biotech
標題[求救] ELISA吸光值低
時間Sat Jul 23 06:44:28 2011
各位大大, 我最近遇到一個問題,因為要偵測的蛋白質沒有賣KIT,
所以自己架設ELISA,先用AB COATING O/N, 然後用PBST wash,
用5% non-fat milk blocking 一小時,加樣品培養2小時,
在用不同的ab incubate 2 hr 然後incubate with HRP-congugated 2抗 1 hr
之前做出來的結果都非常成功吸光值很高,但是這幾個禮拜不知道為什麼,
即使用positive conctrol當樣品得到的吸光值跟之前比較都非常低,
請問各位大大有甚麼方法可以解決嗎?
非常感謝~~
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◆ From: 129.111.180.54
1F：推 Rarelay:一種一種換換看是不是 buffer 還是抗體壞掉 07/23 14:16
2F：推 robinduck:buffer 的pH值很重要，差一點就差很多！ 07/24 00:37
3F：→ hi1214514:謝謝樓上大大的建議,我會先重配buffer和注意pH值,還有 07/24 06:57
4F：→ hi1214514:請問要怎麼測抗體呢?謝謝~! 07/24 06:58