作者BaMV (我一個人住)
看板Biology
標題[問題] Tm and Annealing temperature
時間Fri Dec 18 14:35:35 2009
【問題】：PCR annealing temp
【問題起因】： 簡單的PCR，一般我都是看primer單子上Tm值-10
當成第一次aanealing temperature
Tm - 5 當成第二次annaealing temperature
這次做的band卻微弱不清楚
Tag 用pfx(blunt ebd PCR)
因為要接進TOPO系統
所以Primer設計也有些變動
但我想應該不至於影響
我的問題是不知道有沒有人用別的方式計算annealing temperature
我想試試看怎麼樣算會比較好一點
【個人看法】： 還請大家提供一點意見了，謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.154.105
1F：推 rtype2d2:AT 2 degree, GC 3 degree 12/18 16:05
2F：→ saviora:樓上的應該是AT2 GC4 不過這個公式有限制 12/19 08:30