作者hoop0227 (阿啾)
看板Biology
標題[問題] K562 tatol protein
時間Wed Sep 16 23:12:15 2009
不好意思我想請問一下K562和羊水幹細胞哪個大呢?!
因為我最近在萃取PROTEIN
可是一直都做得不是很好,
到最後一步離心完整個是很清澈,
然後去測OD值的結果也超低的!!
所以我在想我是不是因為細胞太小雖然細胞數足夠(6*10^6)
但因為細胞小所以蛋白質少!!
以下是我的步驟!!
1.用 cold d-PBS wash 兩次4度C 1500rpm 5min
2配lysing buffer + protease inhibitor
3.cell pellet vortex
4.加50ul的 2.
5.劇烈vortex 之後冰上作用十分鐘
6.離心10000 rpm 2min 4度C
7.取上清液到新epp
8.存20度C
麻煩幫我鑑定一下我到底哪裡出問題!!
拜託大家了>"<!!
因為我有時間上的限制!!
謝謝....
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1F：推 vixen:lysing buffer是什麼? 09/16 23:23
2F：→ vixen:離心完後可以把沈澱物拿去顯微鏡底下看並用trypan blue染 09/16 23:25