※ [本文轉錄自 Biotech 看板] 作者: hurp (有誰想去看囧男孩? 台北) 看板: Biotech 標題: [討論] Leukemia 細胞的再篩選 時間: Tue Oct 7 17:34:49 2008 小弟要做leukemia相關的研究.目前打算用HL-60 (Acute Myeloid Leukemic cell line) 跟 Molt-4(Acute Lymphoblastic Leukemic cell line)這兩種人類的cell line建立 animal model. 理論上, 把SCID 或是NOD/SCID irradiate之後, 把細胞打到老鼠體內. 這些細胞會 跑到骨髓並生長,過了大約50~70天, 這些leukemic cell就會大量生長,跑到周邊血液, 並造成老鼠發病及死亡. 為了要讓後續的實驗時間縮短,也讓實驗結果更穩定.我想要篩選出可以在老鼠體內容易 生長的subclone細胞. 實驗設計上,就是把細胞打進去老鼠體內之後,觀察老鼠的病徵.等到有病徵出來之後, 開始每隔一天抽靜脈血,看看周邊血液裡Mononuclear lymphoid/myeloid cell 是不是 有增加, 並找出增加的peak, 在peak的時間點採全血, 分離出circulating的leukemic cell. 同學說,這種方法取得的leukemic cell數量可能很少.或許我可以直接把骨髓裡 的細胞沖出來,取得比較多量的leukemic cell. 我想問的第一個問題,就是從周邊血液裡取leukemic cell,跟取骨髓裡的leukemic cell, 這兩種方式的可行性各為如何? 第二個問題,假設我解決了上述的問題,手上取得了一坨富含leukemic cell的 cell pool,我該怎麼分離human leukemic cell? 小弟身邊沒有cell sorting的資源,沒辦法用anti-human surface antigen的ab把 human leukemic cell分離出來.手上能用的,只有ficoll-paque.照其他paper的說法, 他們可以用ficoll-paque取得80%以上純度的mononucleus leukemic cells. 但是我擔心這樣子篩出來的clone,養到最後純度會掉很多. 希望版上的先進高手,能給些意見. 非常謝謝,感恩啦! --

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