作者phillipo4 (Love Inzaghi)
看板Biology
標題[問題] RT-PCR
時間Sun Sep 14 21:02:56 2008
請問我如果Wild type跟我的sample下的rna量都一樣
但是最後RT-PCR結果Actin顯示兩個band的亮度差很多
那是代表什麼?
因為Actin如果不一樣深度的話,人家會質疑說我下的量都不一樣
可是我再加藥之前都有先定過量
我下500ng 的rna
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◆ From: 59.117.66.150
1F:推 vixen:你wild type與sample的RNA量是怎麼定量的? UV? 看tRNA? 09/15 00:35
2F:推 dankai:actin只是對照說你的sample RNA定量沒問題~而且你做各部位 09/15 01:16
3F:→ dankai:表現時~各部位間一定會不一樣!但actin在各部位間一定是相同 09/15 01:18
4F:→ dankai:其實合完cDNA我還會再定一次量...參考看看吧! 09/15 01:20
5F:推 aggaci:樓上 請問cDNA做完你怎麼定量?OD?怎麼去除多餘的dNTP? 09/15 16:51
6F:推 daniel2806:應該用個housekeeping gene來定量吧?! 09/15 17:05