看板Biology
標 題Re: 板上有沒有人在作electroporation的？
發信站KKCITY (Mon Mar 12 20:58:19 2007)
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※ 引述《[email protected] (燃燒我的小宇宙)》之銘言：
> 最近要試一種新的轉染細胞方法，
> 我使用的是電穿孔(electroporation)，
> 但是做了幾次也查過相關資料，
> 細胞不是死一堆就是DNA給我進不去，
> 如果一直沒辦法的話，
> 我可能還是會改成用Lipofectamine作實驗吧....= =
> 我使用的是293T這株細胞，
> 不曉得板上有沒有同學是在做這方面的？
> 可以提供小弟一點建議，
> 謝謝囉~
293T??
這是一株超級容易把DNA送進去的細胞
即便是用CaPO4都能達到至少在50-60%以上的transfection efficiency
為什麼還要用electroporation?
若是仍然要使用electroporation
建議可以試試用不同的細胞數跟DNA量
我是用hMSCs, 我是從50萬顆細胞到200萬顆
DNA量是從10ug到100 ug, 後來發現100萬顆細胞/50ug DNA是最好的condition
當然還要調electroporator current/duration
我不知道您的是哪一家廠牌的
不過一般說明書都會有建議用什麼樣的current/duration
試試看吧~~
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