看板Biology
標 題Re: 請問SDS-PAGE封膠
發信站不良牛牧場 (Mon Sep 18 01:21:44 2006)
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※ 引述《[email protected] ( )》之銘言:
: ※ 引述《[email protected] ( 475)》之銘言:
: > 請問大家會一直破的原因是什麼?
: > 我之前封沒破過
: > 換一個LAB後破得慘不忍睹
: > 是呈現龜裂那樣子
: > 退染後還要經過什麼處理嗎?(我記得甲醇好像會讓膠容易破)
: > 玻璃紙跟年糕紙是一樣的嗎?
: > 或是大家知道有什麼方法讓膠不容易破
: > 麻煩告訴我
: > 謝謝
: 好像都是用玻璃紙吧 年糕紙沒用過
: 不過聽你的說法應該只是封的時候兩張玻璃紙間有氣泡沒趕掉
: 只要有一點點氣泡乾了以後就會像你說的破的亂七八糟
可以去查molecular cloning
裡面有寫到可以用fixing solution泡過(傳統方法用bromophenol blue染色)
再用drying solution泡O/N(20% methanol, 3% glycerol)
之後再封膠會有改善
不過氣泡跟膠的厚度是最重要的原因
有氣泡一定會破泡什麼solution都一樣
如果做1.5mm的gel因為比較厚也比較容易在封片時有氣泡產生要格外小心
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大家都是從不知道破了幾片之後才成功的吧~~~
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