作者lovepig414 (pig)
看板Biology
標題Re: [問題] 關於DNA沉澱
時間Tue Apr 25 01:46:15 2006
※ 引述《fjubiology (Proposal結束)》之銘言:
: ※ 引述《lovepig414 (pig)》之銘言:
: : 抽DNA的時候(不論是否用kit抽)
: : 最後都會加入99.9%酒精吧 好像還有一些鹽類
: : 這步驟好像就是沉澱DNA的吧
: : 不過是為什麼呢 是跟極性有關還是跟pH值有關呢
: : 真的是不懂壓 有人可以解答我的疑惑嗎 感恩唷
: 在適當濃度的陽離子(Na+, NH4)存在下,ethanol或isopropanol均可使核酸結構生改
: 變,分子聚集成團狀而從溶液中沉澱出來。Isopropanol相對於ethanol,其揮發性低
: ,在核酸沉澱後較不易自行揮發去除。且在以isopropanol沉澱DNA時,鹽類傾向與核酸
: 一起沉澱,因此一般在isopropoanol沉澱後,應以70% ethaol清洗DNA以便將鹽類去除。
: 沉澱DNA所需之ethanol體積:無水酒精(100%)為DNA體積2~2.5倍
: isopropanol體積為DNA溶液體積之0.6倍
: 樓上的應該是問這個,而不是70%酒精洗鹽的步驟。
恩 謝謝大大的回答 我是要問這個的
可是我還是不知道真正的原因耶
為什麼要用99.9%的酒精來將DNA溶解作沉澱
而70%酒精可用來清洗 是極性所導致的嗎?
阿可以解說一下
為什麼在適當濃度的陽離子下 (我想一般都是用醋酸鈉吧)分子會聚集成團呢?
是因為其為鹽類而解離出的正負電離子進而促使帶負電的DNA聚集嗎?那pH值有什묊麼影響呢?ꄹ因為醋酸鈉的pH值好像要配在5.5吧!那為什麼需要酒精呢?用鹽類不就可ꔊ以沉澱了嗎?
不好意思唷 我好像問太多了 不過我真的很想懂 這種資料應該很難找到吧
所以才問問大家的 希望 能移除疑惑再繼續做實驗囉 拜託有人解答唷 感恩똊
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1F:→ apa9394:想知道為什麼...問香蕉吧... 04/25 12:07