作者agbug (金属史莱姆骑士)
看板TransBioChem
标题Re: [微生物]请问计数法
时间Fri Oct 21 10:04:10 2005
※ 引述《fierybear (干...我改名纤维熊)》之铭言:
: ※ 引述《giooy (追求流行元素)》之铭言:
: : 平板计数法(plate count method)
: 优: 便宜方便
所求的~ 一定是生菌数~ 方便计算~
: 缺: 容易误差,有的不能养(很臭...我乱说的)
求生菌数的话~ 误差不大~ 但对於一些菌~ (出芽的~ 连在一起的~)
会有2X以上的误差~ 但取个log作图就看不太出来了~
缺点2:无法求得菌液中的survival fraction
: : 血球计数法
: 是指Blood plate吗
: 优: 很营养,大部分都可以养
: 缺: 容易坏掉,贵
这边应该是用血球计数器
优点是可以用一些染剂求得survival fraction
缺点是麻烦~ 伤眼~ 不如plate count好算~
看老板~ 有些人很在意survival fraction这种数据~
我是不太在意啦...我只考虑生菌数~
把这个问题想的太复杂..有时只是逼死自己而已~
: : 分光光度计计数(O.D值)
: 优: 精准,可以量液体 (无法在plate生长的)
除了厌氧菌有些比较例外
大部份好像能在broth生长的~ 就一定能在plate中生长
(也许有些菌我没接触过吧)
优点是:作蛋白质表现或跑发酵槽的较常用
即使菌体死亡~ cell lysis掉~ (不会全部分解的很乾净)
但是蛋白质一样存在~ 一样会影响吸光质~
: 缺: 量低浓度比较适合,高浓度误差大
高浓度的话~ 可以做稀释~ 所以这个影响不是很大~
只要注意自己的分光光度计可以测得最高值是多少就好~
只是每一批的吸光值可能跟生菌数会有点差异~ (不过还好~ paper能接受就好)
无法忠实反应出溶氧量对生菌数的影响~
最严重的缺点一样是无法测得survival fraction
(不过如果实验不在意这一点的话~ 倒是挺好用的~)
这对於做杀菌实验是相当不利的~
: (原因老师没说过问老师他会很爽,觉得你很用功)
: 这只是大略啦,如果是写报告...自己在想一下掰一下
: 手边没书,只能凭印象
剩下的想不到了~ 早餐还没吃~ 昏昏沉沉~
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