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注意 这皆只有实验结果 关於目的和步骤 从缺~~~~~~ 实验九 血球计数与血红素量 目的:学习测量人体血液单位体积内红血球数和白血球的数目与血红素浓度 结果: 1.红血球数目 1 2. 3 4 5 总计 每16小格的总数 80 83 112 106 96 507 血液中红血球数5.07×106 个/mm3 (正常的女性红血球数目约为4700000个 / mm3,关於红血球的数目详见讨论第一点。) 2.白血球数目 1 2 3 4 总计 每大格的总数 15 12 11 16 13.5 血液中白血球的总数 2700 个/mm3 3.血红素 血红素的浓度为 18g/dL(测出的数值以女性而言略高) 问题与讨论: 1. 红血球计算时为什麽分别用不同的稀释液计算? 红血球计算:因为要计算红血球之前,我们必须把用surfactant lysing agent(sodium laurel sulfate)把hemoglobin转变成稳定态(stable form),像是methemoglobin or cyanmethemoglobin,所以用Hayem氏液,而主要的误差大概源自於红血球基质或白血球产生的混浊。 白血球计算:用Turk氏液,先把红血球hemolysis,以免干扰计数,并且可以固定白血球,染出白血球的细胞核,。 (唉…..查了几本书後,实在找不出很明确的答案,只找到几行相关的) (资料来源:Pratical Guide to Modern Hematology Analyzer ,1995) Discussion: 1. 红血球如果呈现过少,可能就是所谓的贫血;但如果过多,就成了红血球增多症。以下分别就这两种疾病加以描述: a. 贫血的种类有分为缺铁性贫血、巨母红血球性贫血,血色素疾病和地中海贫血症候群、溶血性贫血这些种类, 在海平面高度,如果一成年人有以下情形便应该怀疑是贫血了: 男性 女性 红血球量(×百万/μL) <4.5 <4.0 血红素(克每dL) <14.0 <12.0 血球容积 <41 <37 以上的下限数值是利用对大量的正常受测者得到的数值,再加以统计分析所得出。若有人的受测值较以上数值为低则他较可能是贫血的。例如,有一个相当健康的男性,他在每一年的健康检查当中,血红素含量均在每dL16至17克之间,直到有一年,检查表示他的数值在每dL14.5克。虽然这个数值仍在所谓的正常范围内,但对此人而言却是不正常的。 铁质的流失----我们知道铁是血红素主要的成分;一般而言,人体所排出的铁量极微,所吸收的铁质几乎全留在体内正常的男人每天从肠道、汁、尿总共约排出0.9mg的铁质。唯有失血,才会造成有意义的铁质流失,另外女性正常月经期失血量为每月30至90ml,平均值为每月45ml。正常女性平均每天铁质流失量为0.6mg,若加上月经造成铁质的流失,则其平均铁质的流失为每天1.1到2.1mg。 b. 红血球增多症: 红血球增多症通常只血液中红血球浓度增加。病患若持续有下列数值,则可以考虑为红血球增多症。 男性 女性 红血球量(×百万/μL) >6.0 >5.7 血红素(克每dL) >18 >17 血球容积 >54 >51 以上三种有关红血球浓度的数值如果都很高(血球容积超过60﹪),那麽可以说整个循环血液内红血球的总数是增加的,也就是红血球的量增加了;如果这些数值仅仅稍微增加,可能仅是因为血浆容积减少浓缩而造成相对性的红 血球增多症。此时尚须测红血球数量和血浆容积。 红血球增多症的种类----- 1. 真性红血球增多症:血液学上的原母细胞及并且有相同的起源,白血球和血小板也都增加,不限於红血球。 2. 继发性红血球增多症:某些疾病引起红血球生成激素产生过多,而引起红血球增多。 3. 相对性红血球增多症:又叫压力性红血球增多症或假性红血球增多症,病因不明,慢性轻度的红血球增多症,主要为血浆容积减少或正常值低,红血球总量是正常或轻微增加。 2. Hayem氏液:显微镜检查时稀释血液用的溶液,含氯化汞、氯化钠、硫酸钠 和水。 以下是在不同的年龄白血球、血红素、血比容血小板的正常数据范围: 实验十 血比容、血液凝固与红血球沈降速率 目的:测定人体之血容比,血液凝固时间和红血球沈降速率(ESR) 结果: 1. 血比容 离心後红血球所占的体积为 53.5 ﹪ 校正後的血比容为 46.7 ﹪ 2.凝血时间 1.对照 2.石腊油 3.棉花 4.碎冰 凝血时间 25:25 50:30 17:30 没有凝固 回缩时间 55:00 1:30:00 1:08:00 没有凝固 3.ESR 第一小时 12 第二小时 28.5 (正常女性:每小时沈降0至20) 问题与讨论 1. 知道血浆体积後(plasma volume),如何计算全血量? 血球的量=全血量×血比容﹪ 而 全血=血球+血浆 所以如果假设血浆体积为X,则全血量为X÷(1-血比容﹪) 一般人的血比容约45,但如果非贫血的病人,其血比容可能会降到45以下。 血比容的测量方法为离心然後测量血球所占的高度百分比。 2. 静脉血血比容修正值为Hct×0.91×0.96,为何如此? 我们适用试管模拟血管,所以造成血球会往中央集中,越靠管壁反而越少,而我们记录的血比容是以中央的管壁为主,所以乘上0.91加以修正。 因为红血球在沈积的时候是用堆叠的方式,而我们知道红血球的形状并非是圆盘状,而是双凹圆盘,所以在堆叠的时候,血球与血球之间会出现空隙,所以要乘以0.96。 3. 血液凝固时间之正常值? 如果是血液凝固的外在因子被启动,其进行的速率便只受受伤组织所释出的组织因子之量和血液中 第十、第七及第五凝血因子之量的限制,一般组织受到严重伤害的15秒内就会凝血。 而内在路径的进行则较为缓慢,大约需1到6分钟方能凝血。(外在路径与内在路径说明於discussion第一点)。 本实验因为血液是在试管内进行凝固,所以凝血作用由内在路径启动,那些大於六分钟的数据是最终血液完全凝固的时间,其实对照组跟有放棉花的那一组早在1分30秒左右就开始凝血了(此时石腊油那一组尚未凝血),而且棉花那一组在1分30秒的凝的也比较多,故符合一般血液凝固的正常值。 4. 利用本次和血球计数的结果,计算下列各式: ①平均红血球血红素含量(MCH)=血红素/红血球数(Hb g/l/million/mm3=pg) 180 / 5.07= 35.5 (正常值为27至34pg) ②平均红血球体积(MCV)=血比容×10 / 红血球数 (fL)。 46.7×10/5.07 =92.11 (正常人平均值为90fL,而正常的范围是80至100FL) ③平均红血球血红素浓度(MCHC)=(血红素/ 血比容)×100=g / dl ( 18/ 46.7 )×100=38.5 5. 将受试者全部的血液资料和正常值做比较。 正常 受测者 红血球数 4700000/μL 5070000/μL 白血球数 2000至10000/μL 2700/μL 平均红血球血红素含量(MCH) 27至34pg 35.5pg 平均红血球体积(MCV) 正常人平均值为90fL,而正常的范围是80至100FL 92.fL 平均红血球血红素浓度(MCHC) 32至36克每dL 38.5克每dL (资料来源:血液学,p15) Discussion: 1. 凝血脢原活化复合物可经由两种途径产生(事实上此两种途径都会彼此交互作用)(1)外在路径(extrinsic pathway),由於血管壁或附近组织受损;(2)内在路径(intrinsic pathway),始於血液本身的受损。 此两种途径均有许多不同的血浆蛋白(特别是β球蛋白)以及其他参与血凝块形成过程之因子(统称为血凝固因子)参与其中,他们大部分均属於为活化的蛋白分解脢,当转变为活化形式时,其脢反应促使一连串的连锁凝血反应产生。 血液一旦离开身体而放置於试管中,启动凝血作用的是内在路径。此时第十二因子及血小板由於与试管壁接触而被活化,并因此启动了内在机转。若容器表面是不可湿性的(nonwettable),例如被矽化的表面,则凝血作用可被延迟达一小时以上。 以下是内在路径的凝血机转图: 2. 放入冰中,使血液的代谢速率降低,所以在实验有限的时间内,几乎看不 到有凝块。 3. 血凝块收缩: 血凝块在形成後的数分钟之内开始收缩,通常在20~60分钟内,血凝块中的大部分液体会被压榨出。 血小板在血凝块收缩 的发生中有着重要的角色,因此,血凝块若是无法 收缩,通常是表示循环血液中的血小板太少。在电子显微镜下,血凝块中的 血小板与不同的纤维蛋白丝黏在一起,同时,陷在血凝块中的血小板不断地 分泌促凝血质,其中之一便是纤维蛋白稳定因子,此因子会使得附近的纤维 蛋白丝形成越来越多的交叉结合键结。血凝块收缩时,破裂血管的两侧也同 时被拉近,而有助於更完善的止血。 4.测量ESR可以知道血液的黏稠度,通常随着年龄的增大,血液黏稠度增加。 --



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