未知菌种的监定 a. TSI agar slant (P59) 功能:1.辨别微生物醣类发酵的差异2.产生H2S的能力 分斜面及底部 只用glucose---迳底部酸性(黄色) ---迳斜面硷性(橘红色) 能用乳糖或蔗糖-迳斜面and底部均酸性(黄色) 不用任何糖-迳均硷性(橘红色) 能生成H2S-迳底部有黑色硫化亚铁沉淀 菌种们: (都是plate) Escherichia coli大肠杆菌 E.coli 底部呈红色，斜面呈黄色。(有点怪) 不能生成H2S。 Pseudomonas aeruginosa 绿脓杆菌 全部都呈现红色，因此不会利用葡萄糖、乳糖和蔗糖。不能生成H2S。 Shigella flexneri 志贺氏杆菌 全部都呈现红色，不会利用葡萄糖、乳糖和蔗糖。 (焕基看到的是:斜面红色、底部黄色。我认为其只利用葡萄糖。也是不能生H2S) Salmonella Typhimurium 沙门氏鼠伤寒杆菌 会产生H2S(底部有黑色硫化亚铁沉淀)。 不会利用葡萄糖、乳糖、蔗糖。均硷性(橘红色) Alcaligenes faecalis: 粪产碱菌 底部呈红色，斜面呈黄色。(怪怪的)。不能生成H2S。 Proteus vulgaris 普通变型杆菌 全部都呈现黄色， 会利用乳糖和蔗糖，但不会产生H2S。 b. Litmus milk石蕊乳试验 (p64) 功能:了解微生物1.乳酸发酵2.产气3.石蕊的还原反应4.乳凝块形成5.蛋白质分解6.硷反 应 1.乳糖发酵:乳糖 (紫色) 迳 葡萄糖+半乳糖 迳 乳酸(粉红色) 2.气体的产生:细菌发酵乳糖最终产物有时是CO2或H2 在牛乳培养基中，牛乳因酸变 成固体，若有气体产生可看到固态牛乳撕裂产生空隙。 3.石蕊的还原反应: 若无氧当氢离子接收者 石蕊(紫色)迳无色OR牛乳色 4.乳凝块形成 硬性凝块 软性凝块(细菌产生凝乳酵素) 5.水解蛋白质及硷性反应 细菌水解牛乳内蛋白质-迳培养基呈硷性迳石蕊指示剂呈现深紫色 AND培养基乳浆状 菌种们: Escherichia coli大肠杆菌(P59) 呈淡粉红色，因此E.coli 可以进行乳糖发酵，而且有硬性凝块产生， Alcaligenes faecalis: 粪产碱菌(P59) 紫色 Lactococcus lactis ATCC 11454 其他组别的L.lactis ATCC 11454 都有出现明显颜色变 化和凝块出现，应该是我们的L.lactis ATCC 11454 没有接种成功。(怪怪的) Pseudomonas aeruginosa 绿脓杆菌(P59) 紫色 C.SIM deep(p67，p61) 功能:1.测定微生物分解tryptophan的能力(藉由indole和Kovac试剂的反应) 如果上层呈红色迳 indole-positive 2.测定微生物产生H2S的能力，和微生物在SIM培养基的mobility。 菌种们:(都是plate) Enterobacter aerogenes 产气肠杆菌 不会产生硫化氢，而且不具有运动性。 不可分解tryptophan(上层没红色) Salmonella Typhimurium 沙门氏鼠伤寒杆菌 ( p59) 会产生硫化氢，而且具有运动性。(没有做indole试验) Klebsiella pneumonia 克雷白氏肺炎菌 不会产生硫化氢，但具有一点点运动性。 --------------------------实验二十六 ------------------------------------------------- Escherichia coli大肠杆菌(P59 、64) 可分解tryptophan(上层呈红色) 不具运动性 Proteus vulgaris 普通变型杆菌(p59) 可分解tryptophan(上层呈红色) 具运动性 Enterobacter aerogenes 产气肠杆菌(上面就有了) 不可分解tryptophan(上层无红色) 不具运动性 D.Tryptic nitrate broth (p71) 功能:测试微生物还原nitrate的能力 NO3- + 2H+ + 2e- NO2- +H2O Nitrate 还原 Nitrite+(reagent A and reagent B变红色) 有些细菌会把NO2-变成 N2 (无色) NO3- N2 都是无色傻傻分不清楚故加入Zn(请记住是加到无色的试管喔) 加入Zn後变红色，代表此细菌无法还原NO3- 阴性 若加入Zn後无色，代表此细菌可以还原NO3- 阳性 细菌们:(都是plate) Escherichia coli大肠杆菌(P59 、64 67 61) E.coli 加入solution 後的结果，变成红色，表示E.coli 可以将nitrate 还原成nitrite。 Alcaligenes faecalis: 粪产碱菌(P59 64) 一开始加入reagent A and reagent B呈无色，加入Zn後呈红色表示 牠是阴性。 Pseudomonas aeruginosa 绿脓杆菌(P59 64) 一开始加入reagent A and reagent B呈无色，加入Zn後仍呈无色，表示P.aeruginosa 可 将nitrate 还原成氮气。 E .MR-VP broth(p68) 功能:测定微生物氧化葡萄糖而产酸的能力 E.coli将葡萄糖分解产生酸-----迳甲基红呈红色(阳性) E.aerogenes会继续将此酸性产物分解成非酸性产物---迳甲基红呈黄色(阴性)+Barritt’ s试剂-迳变红色 细菌们:(都是plate) Escherichia coli大肠杆菌(P59 、64 67 61 71) E.coli， Methyl red test 的结果呈红色，表示E.coli 可以将葡萄糖分解而产酸。 Voges-Proskauer test 的结果，E.coli，呈黄色。 Enterobacter aerogenes 产气肠杆菌(p67 71) Methyl red test 的结果，E.aerogenes，呈橘色 Voges-Proskauer test 的结果，E.aerogenes，呈红色，表示E.aerogenes 可以将葡萄糖 分解而产酸，再继续分解成非酸物质。 F.Simmons citrate agar slant(p69) 功能:监别各种肠内菌是否可利用citrate为唯一碳源 Bromthymol blue指示剂从绿色迳深蓝色(阳性) 菌种们: Escherichia coli大肠杆菌(P59 、64 67 61 71 68) E.coli，呈绿色 Enterobacter aerogenes 产气肠杆菌(p67 71 68) E.aerogenes，呈蓝色，表示E.aerogenes 可以利用citrate 作为碳源。 G.尿素酶试验(p63) 功能:若微生物可分解尿素迳使酚红变深红色 细菌们: Escherichia coli大肠杆菌(P59 、64 67 61 71 68 69) E.coli 不会分解尿素 Proteus vulgaris 普通变型杆菌(p59 67 61) P.vulgaris 会分解尿素所以成红色 H.Trypticase soy agar slant(p31) I. Tributyrin agar plate(p56) 功能:lipid hydrolysis Triglyceride tributyrin在水溶液中呈现乳浊状，若细菌分泌脂肪酶则可将之分解成水 溶性之酪脂酸及甘油迳在菌落周围乳浊状消失，产生清澈区域。 菌种们: Escherichia coli大肠杆菌(P59 、64 67 61 71 68 69 63) Bacillus cereus 仙人掌杆菌 呈现糊糊的样子 Pseudomonas aeruginosa 绿脓杆菌(P59 64 71) 有颜色变化 Staphylococcus aureus 金黄色葡萄球菌 J.Milk agar plate(p56) 功能:测试微生物可不可以分泌蛋白酶 菌种们: Escherichia coli大肠杆菌(P59 、64 67 61 71 68 69 63 56) Bacillus cereus 仙人掌杆菌(p56) 可以产生蛋白酶。 Pseudomonas aeruginosa 绿脓杆菌(P59 64 71 56) 可以产生蛋白酶。 Staphylococcus aureus 金黄色葡萄球菌(p56) K.MacConkey agar plate(p29) 功能:革兰氏阳性菌会被抑制生长 细菌分解乳糖产生酸，使酸硷指示剂呈红色。 菌种们: Escherichia coli大肠杆菌(P59 、64 67 61 71 68 69 63 56) 红色一片迳革兰氏阴性菌且能分解乳糖 Staphylococcus aureus 金黄色葡萄球菌(p56) 是革兰氏阳性菌，被抑制生长。 Enterobacter aerogenes 产气肠杆菌(p67 71 68 69) 红色一片迳革兰氏阴性菌且能分解乳糖 Salmonella Typhimurium 沙门氏鼠伤寒杆菌 白色一片迳革兰氏阴性菌但不能分解乳糖 大家期末加油!! 二一的路上没你没我 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.246.119