一、是非题 在硷溶裂法中，solution I、II、III中各成分的作用 (X)(1)EDTA可以移除1价离子 (O)(2)SDS的作用是使细胞膜变性 (X)(3)醋酸可以使DNA denature (O)(4)NaOH可以使DNA denature (O)(5)Tris-HCl(pH8.0)可以使溶液维持酸硷度 二、选择题 (ACD)1.下列何者是在使用pipetman时不可做的动作? (A)使用时要快吸取buffer，避免buffer变性 (B)使用完要条回最大吸收值 (C)为了省钱，tip尖端碰到东西还是要继续使用 (D)将pipetman归零意指将pipetman数值调成0 (E)避免把pipetman倒置 ( B )2.Phage侵入宿主的步骤 1.Maturation 2.Adsorption 3.Peneration 4.Release 5.Replication 请选出正确顺序 (A)1->2->3->4->5 (B)2->3->5->1->4 (C)2->5->1->3->4 (D)3->2->5->1->4 ( B )3.在plaque实验中，E.coli与medium的比值是多少? (A)1:10 (B)1:100 (C)1:1000 (D)1:10000 ( C )4.下列哪个选项是plaque实验中不会用到的? (A)top agar (B)IPTG (C)EtBr (D)NaCl ( C )5.下列哪个选项是plaque实验中计算力价的公式? (A)Pfu/L = 溶菌斑数目 / 稀释倍数 (B)Pfu/ml = 溶菌斑数目 / 稀释次数 (C)Pfu/ml = 溶菌斑数目 / 稀释倍数 (D)Pfu/ml = 菌落数目 / 稀释倍数 ( B )6.在plaque实验中，day one的E.coli需养至O.D.多少? (A)0.4~1.0 (B)0.5~1.0 (C)overnight (D)依自己喜好 ( D )7.下列哪个选项是plaque实验中所使用的phage与E.coli品系? (A)M13与ES2738 (B)T4与BHK (C)T13与ER2738 (D)M13与ER2738 ( A )8.下列哪些试剂含有EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid)? (A)Solution I(质体萃取) (B)PCR的reaction buffer (C)Solution III(质体萃取) (D)Solution II(质体萃取) ( E )9.Taq polymerase是从细菌所分离出来，请问此细菌最先是由何地取得? (A)敦煌莫高窟 (B)侏罗纪公园 (C)马达加斯加 (D)大峡谷公园 (E)黄石国家公园 (F)死海 (G)义大利维苏威火山 (H)直布罗陀海峡 (I)深海的火山喷发口 ( A )10.请问下列何者不是萃取质体的方法? (A)超音波法 (B)沸腾法 (C)锂盐法 (D)硷溶裂法 三、填充题 请写出下列的pipetman各是显示吸取多少体积溶液(需写出单位) P200 P20 P200 P20 P1000 ┌─┐ ┌─┐ ┌─┐ ┌─┐ ┌─┐ │1 │ │0 │ │3 │ │1 │ │6 │ ├─┤ ├─┤ ├─┤ ├─┤ ├─┤ │5 │ │8 │ │7 │ │5 │ │9 │ ├─┤ ├─┤ ├─┤ ├─┤ ├─┤ │6 │ │5 │ │0 │ │6 │ │0 │ └─┘ └─┘ └─┘ └─┘ └─┘ (156ul)(8.5ul) ( X ) (15.6ul)( X ) 四、简答题 1.请简述硷溶裂法如何把质体和染色体分开? Ans:利用含SDS的硷性溶液处理细胞。SDS可将细胞膜打破，而硷会破坏DNA的氢键 导致DNA变性(由双股变为单股)，再加入酸性溶液中和使单股DNA回复为双股DNA。 在急速中和反应下，染色体DNA因分子庞大硷基匆忙配对形成一杂乱无序的巨大分子 对水溶解度相对较低。而质体DNA因分子小，两单股硷基恢复配对快，对水溶解度 相对较高，因此经过离心後即可将染色体DNA与质体DNA分离 2.请问用EtBr染色完之後要如何观察才会使EtBr发出萤光? Ans:在紫外灯下观察 3.请问IPTG的功能为? Ans:诱导细菌表现其蛋白质 4.有四段DNA，分别是200bp、300bp、700bp、1kb、2kb，分别load进下图五个well中 并以此电场进行电泳，请问这五段DNA於跑完电泳後会如何分布在电泳胶片上 并说明理由。 ┼ ┌────────────────────┐ │ ┌─┐ ┌─┐ ┌─┐ ┌─┐ ┌─┐ │ │ └─┘ └─┘ └─┘ └─┘ └─┘ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ └────────────────────┘ ─ Ans:sample通电後会马上往胶片上方跑并且跳海，故跑不出结果。 因为DNA带负电，所以当通电後，DNA会从负极往正极跑造成跳海。 以上是这次的考试题目及答案 --

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