http://72.14.235.104/search?q=cache:LRaKmujXhaUJ:www.spec-g.com.tw/twherb/Agriculture.aspx%3FP%3DC%26ID%3D3+%E7%9F%B3%E6%96%9B+%E8%90%83%E5%8F%96+%E5%A4%9A%E9%86%A3&hl=zh-TW&ct=clnk&cd=1&gl=tw Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng . 【基原】 为兰科 Orchidaceae 植物霍山石斛 Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng 的茎。 　 【 性状监别 】 　　茎丛生，直立，肉质状，长 3～9cm，从下部向上逐渐变细，下部直径 2.5～3mm 或 更宽，具 3～7 节，淡黄绿色，有时带淡紫红色斑点。叶薄革质，2～3 片互生於茎的上 部，舌状长圆形，通常长 2～3cm，宽 0.5～0.7cm，端钝并且微凹。总状花序出於已经落 了叶的茎上部；花苞片浅白色带栗色，卵形，长约 3mm；花黄绿色，稍有香气，中萼片卵 状披针形，长 1.2～1.4cm，宽 0.4～0.5cm，端钝；侧萼片镰刀状披针形，长 1.2～ 1.4cm，基部宽 0.5～0.7cm，端钝；萼囊短钝而近圆形；花瓣卵圆形，与中萼片等长而稍 宽，端钝；唇瓣近阔菱形，长宽约相等，为 1～1.5cm，基部楔形并且具一个胼胝体，上 部稍 3 裂，侧裂片近半卵形，两侧裂片之间密生短毛；中裂片半周状三角形，基部密生 长白毛，并且具一个椭圆形横向的黄色斑块，端近尖；蕊柱足密生长白毛；药帽绿白色， 近半球形，顶端微凹。花期 5 月。 幼茎性状 　　茎 50～60 条密集丛生。幼茎椭圆状纺缍形，两端尖，长 1～3cm，中部直径约 5mm ，肉质粗壮，具 4～5 节，节间长 2～5mm；以後逐渐茎伸长或长茎（开花时）长可达 6 ～7cm，基部以上较粗，渐上渐细呈梢状。叶及花序轴着生於梢端的第 2 节及第 2 节上 。 　 【组织监别】 茎横切面 类圆形，边缘有 5～8 个浅波，角质层厚 5～6μm；表皮为 1 列扁平形细胞，皮下层 1 列细胞，扁长圆形；基本薄壁细胞大小较近似，散列多数有限外韧型维管束，略排成 3～ 4 圈。维管束外侧纤维群近半圆形，与木质部内侧的纤维群相连成环状，有 1～2 列纤维 ，纤维直径 12μm，壁厚 2～3μm。木质部管孔大小相近，3～5 个孔直径 10μm，内侧 有 1～2 列木纤维，纤维直径 15μm，壁厚 3～4μm。 　 【栽培与管理方法】 组培育苗工作情状简单介绍如下： 1. 原球茎的发生 　 　　霍山石斛蒴果内的成熟或未成熟种子，均可在离体条件下获得原球茎。方法是： 将野外采集到的果实经肥皂水清洗後，於 70% 的酒精中漂洗 30 秒钟，然後於无菌操作 条件下置於 3% 次氯酸钠消毒液中消毒 20 分钟，无菌蒸馏水冲洗 4～5 次後，放置於含 灭菌滤纸的培养皿中备用。也可采用 0.1% 升汞 15 分钟消毒果实。最方便的方法是将清 洗後的果实在无菌操作的条件下，於 95% 乙醇中浸一下後，迅速於酒精灯上灼烧一下（ 注意不要烤），也可达到消毒处理的目的，效果也甚佳。 　　 经消毒处理後的果实於无菌条件下切开一个口子，将成熟或未成熟的种子播种到培 养基上。石斛种子萌发的培养基可采用 Kaudson 或 MS 基本培养基，而不需要添加任何 植物激素，蔗糖浓度 3%，琼脂 0.8%，pH5.4，培养条件为 25 ± 1℃，光照强度 2000lux 左右，每天光照 10～12 小时。 　　 种子在基本培养基上先由黄转绿，胚开始膨大逐渐充满种皮，最後突破种皮形成明 显可见的原球茎。从种子到原球茎的形成约需 40 天左右。其种子萌发除与种子成熟度有 关外，还受营养条件和光的影响，需在培养中加以注意。除利用种子萌发原球茎外，也可 利用无菌条件下原球茎分化形成的试管苗的茎尖，假鳞茎和节等。 2. 原球茎的增殖和壮苗培养 　 　　霍山石斛原球茎的增殖可利用 1/2MS 的培养基（MS 基本培养基大量元素减半， 蔗糖浓度 3%）。在这一不加任何激素的培养基上，原球茎既能增加鲜重，又保持不分化 状态。 　　 为了使原球茎分化形成完整的霍山石斛正常试管苗，促使苗的正常生长，可在 1/2MS 基本培养基的基础上附加 10～20% 的香蕉提取液，使苗叶色浓绿，根系发达。也 可添加生长素 NAA（2mg/L），使石斛试管苗更健壮，但一般以不加为好。通常情况下， 由石斛种子萌发到形成可以移栽的带有 3～4 片叶的根系发达的试管苗约需 10 个月左右 。 3. 霍山石斛试管苗的移栽和繁殖 　 　　霍山石斛是一种附生植物，喜生於热带和亚热带的多湿森林中的树上和林下岩石 上，特别是半阴半阳的附有苔藓植物的石灰岩上和树上。根据其生境的生态要求，其栽培 方法因地层种类而有不同，有树上栽培、岩石栽培、石墙栽培、岩壁栽培、阴棚栽培和盆 栽等。 　　 根据经验，霍山石斛的试管苗移栽并不复杂。可将组培小苗先在开放条件下锻炼一 段时间，洗净根上的培养基，於 0.1% 高锰酸钾或灭菌灵消毒後，用水苔包好根部移植到 下层铺有酸性或中性片磨岩、砂岩，中层含腐殖质土和蛭石混合，上层铺有蛭石、砂岩的 移栽苗床中。其移栽成活率可达 95% 以上，且生长健壮。 　　 霍山石斛的移植以 5 月份为宜。栽培要加强管理，严防阳光直射，保持栽培环境的 湿润，防止鼠害和病虫害的发生。 　　 作为享誉世界的霍山石斛的产品“霍斗”、“霍斛”。长期以来已绝迹於市场。应 当加大力度开展其组培育苗与移栽大田种植的研究实验和大规模的种植工作，这不仅是挽 救这一濒危灭绝的物种，而且可以满足国内外市场之需。 【炮制方法】 1. 整理： 　 鲜石斛原料去根、花序梗并剥去叶鞘，短条留用，长条切短段（5～7cm）。 2. 烘焙： 　 低温烘焙，除去水分并软化，以便於卷曲，同时在软化过程中，尽可能除去残留叶鞘 。 3. 卷曲加箍： 　 加箍的目的使卷曲紧密，不致散开，形态美观，均匀一律。加箍的制作材料一般是用 稻草杆。 4. 乾燥： 　 乾燥的关键是要低温，以避免枯焦。产品应呈金黄色。 　 【活性物筛选】 1. 赖思良，霍山石斛对视网膜病变及免疫调节作用的研究，国立阳明大学，生物药学研 究所，89 学年度。 　 [ 摘要 ] 　 　　霍山石斛为名贵的传统眼科中草药，本实验室研究霍山石斛的作用机转，发现水 萃取物可促进视网膜色素上皮（RPE）细胞一氧化氮（NO）的生成及肝生长因子（HGF）的 基因表现，且这与 RPE 吞吃作用相关。此外，也发现粗萃取物可抑制 RPE 细胞 bFGF、 VEGF、TGF-β 基因的表现。糖尿病视网膜病变为眼底异常而产生血管新生的病变。首先 我们以霍山石斛的眼科应用为出发点，探讨其对眼底病变的疗效。 　　 已知蛋白质醣化与糖尿病并发症密切相关。在实验管内以醣化的蛋白作为单一的致 病因子，发现在 1g/ml 的醣化白蛋白（AGE-BSA）处理下即会使 RPE 细胞 VEGF 与 bFGF 的基因表现量增加，此二因子与视网膜血管病变相关，也发现处理醣化白蛋白亦会 使视网膜微血管内皮细胞增生。实验中以 FITC 标定 AGE-BSA 处理 RPE 细胞时发现，培 养的 RPE 细胞会与 AGE-BSA 明显结合。对取自新鲜牛眼之 RPE 细胞相较於视网膜其他 部位的细胞具有较强的蛋白质水解活性，能有清除醣化白蛋白的作用，而霍山石斛甲醇粗 萃物能提高 RPE 细胞对醣化蛋白质降解活性。 　　 我们建立一个由醣化白蛋白引起的全身性的糖尿病并发症模型，来观察全身及视网 膜的病变。首先自小鼠血清中大量纯化白蛋白，并在试管中进行 60 天的醣化作用後，再 以静脉注射方式给予不同剂量醣化的白蛋白，在持续给予醣化白蛋白的六周观察发现，在 血糖及尿糖的量并未发生太大变动。进行组织病理的观察发现肝脏在靠中央静脉部位的肝 细胞有坏死情形，并且观察到血清肝生长因子量会随之上升。尿液中的蛋白质成分有些微 变化，但并不显着。在肾脏丝球体中会有物质堆积形式，推测此模型亦对肾脏功能会有所 影响。石斛在古中医书中属上品，亦有调节生体机能的记载。我们与新药研究中心合作， 对霍山石斛的水萃层部分进行多糖成分的萃取，於动物体的实验中观察到喂食石斛多糖三 天的小鼠会增强自然杀手细胞毒杀活性，同时也能增强骨髓细胞受 L929 培养液共同刺激 的增生作用。在抗体免疫上，发现口服石斛多糖对口服以 ovalbumin 或 Pneumovax 23 多糖疫苗为抗原，在血清中的 IgM、IgG 量无明显变化，而对黏膜免疫具增强效果，能增 加在肠道中的 IgA 抗体量。 　　 本研究中发现，醣化白蛋白会使 RPE 细胞表现血管新生因子，而 RPE 具结合与降 解 AGE-BSA 活性，霍山石斛对此有促进效果。我们也建立醣化白蛋白诱发糖尿病并发症 动物研究模型，可进一步提供药物评估的平台。我们也发现口服喂食霍山石斛多糖的免疫 调节功能。相信这些结果能对霍山石斛的效用有更进一步的佐证。 2. 陈囿任，霍山石斛对脑神经细胞及视网膜色素上皮细胞作用机转之研究，国立阳明大 学，生物药学研究所，88 学年度。 　 [ 摘要 ] 　 　　神经损伤是多种脑部病变之重要指标，目前已知成鼠前脑具有能分化成多种细胞 之神经祖原细胞存在，若是给予这些细胞上皮细胞生长因子或是硷性纤维母细胞生长因子 则能在试管中培养出神经祖原细胞。为了设法修补已受伤的神经细胞或防御神经退化疾病 的发生，我们培养大白鼠神经祖原细胞来筛选具有促进脑神经细胞生长、分化之活性成分 。 　　 脊椎动物的眼睛具有两层由神经演化而来的组织，分别是视网膜神经细胞及视网膜 色素上皮细胞（RPE）。RPE 其中一个最重要的功能就是吞吃由杆状光接受器掉落的外段 袋膜（ROS），其吞吃的功能与光接受器的机能维持息息相关。因此，我们建立一简易侦 测 RPE 细胞吞吃的萤光分析模型来区分被 RPE 细胞吞吃进去或只是结合在细胞表面的 ROS。 　　 霍山石斛是民间眼科中药，因为 RPE 是由神经外胚层所衍生而来，因此我们亦研究 霍山石斛对於脑神经祖原细胞的影响。本实验室与新药研究中心合作，利用甲醇萃取，并 经过化学溶媒分层法、 Sephadex-LH20 管柱及高速液体层析管柱进行有效成分分离，发 现 DCMPeL 4C10 区分物在 1ug/ml 时具显着促进神经祖原细胞生长达 1.4 倍，并具有促 进其分化的效果。而 DCMPeL 6C7 区分物在 1ug/ml 时能显着促进视网膜色素上皮细胞整 个吞吃过程及将 ROS 吞吃进去的能力，分别有 2.8 倍及 1.9 倍的促进效果。 　　 本实验室初步结果显示：霍山石斛粗萃取物促进 RPE 之作用机转与一氧化氮（NO） 的生成及肝生长因子（HGF）的基因表现有关。NO 在视网膜生理及病理过程中扮演着调控 的角色。本实验室已知 NO 生成抑制剂 L-NAME 具有抑制 RPE 之吞吃机能，我们进一步 证实 NO 生成剂 SNP 在微量下具有促进 ROS 与 RPE 结合及被吞吃的作用，但在高浓度 下则有抑制作用。这些结果更证实了霍山石斛促进 RPE 细胞吞吃机能部份是经由 NO 来 达成的。因此，促进视网膜色素上皮细胞微量一氧化氮之产生将可作为眼科疾病药物研发 之新指标。 　　 HGF 是一多功能的因子，具有促进细胞增生、移动及分化的功能。近年来研究推测 肝生长因子在神经系统发育及维持上扮演着重要角色。我们以化学溶媒分层法所得之各霍 山石斛区分物 0.1ug/ml 处理 RPE 细胞，利用 RT-PCR 方式发现 DCMPh 对於 RPE 细胞 之 HGF 基因表现的促进有明显之效果。同时，我们进一步发现 0.1ng/ml 的 HGF 可有效 促进神经祖原细胞生长及分化。因此我们推测 HGF 在正常体内调控细胞的生长、分化及 机能，可能在细胞或组织的修复及功能维持扮演着相当重要的角色。HGF 或可作为细胞再 生药物筛选之正向指标。 　　 我们以无血清培养的研究模型发现了白蛋白可以促进神经祖原细胞的生长分化及 RPE 细胞的吞吃机能，相反的，白蛋白被醣化後即丧失诱导神经祖原细胞生长、分化与 抑制 RPE 吞吃之作用。我们推测在糖尿病及老化的过程中，高度醣化终产物扮演了抑制 细胞生长、分化及机能的角色。如何促进神经祖原细胞及 RPE 的生长、分化及机能，将 可提供药物开发的重要平台。 　　 在本研究中，我们了解霍山石斛具有促进神经祖原细胞之生长、分化及 RPE 细胞之 功能的生物活性成分，而醣化白蛋白则抑制细胞生长、分化及机能，我们相信这些发现将 可应用於眼科疾病及神经病变之预防与治疗。 3. 林佳燕，霍山石斛对视网膜色素上皮细胞及视网膜细胞的生物活性及其有效成份之研 究，国立阳明大学，生物药学研究所，87 学年度。 　 [ 摘要 ] 　 　　视网膜色素上皮细胞位於脉络膜及视网膜之间成一单层，可支持邻近的光接受器 且和正常的视觉功能息息相关。视网膜色素上皮细胞的功能包含：养份及离子的传送、黑 色素的形成、维生素 A 的代谢、吞噬并分解光接受器所脱落的外节、视网膜血管屏障及 光接受器微环境的维持。现在已有报告指出随着年龄的增加，视网膜色素上皮细胞的功能 及数目会逐渐降低。 　　 霍山石斛是民间眼科中药，其作用机转至今仍不清楚。本研究室已经发现石斛的粗 萃物具有促进视网膜色素上皮细胞的吞噬活性，且可抑制 bFGF、VEGF、TGF-b 的表现。 本研究中我们利用具有萤光标定的光接受器外段来测定视网膜色素上皮细胞吞噬的活性， 以萃取分离霍山石斛中的有效成份。而霍山石斛有效成份的分离萃取已经经过化学溶媒分 层萃取法、分子筛层析、HSCCC 及逆向高效液态层析的分离方法。利用吞噬活性测试我们 已经找到石斛中具有促进吞噬活性的纯物质，DCPeL 6C 2C 2L2，其在 2mg/ml 下对视网 膜色素上皮细胞吞噬能力有 1.3 倍的促进效果。 　　 一氧化氮在视网膜生理、病理过程中可能扮演的调控角色近年来也被广为认知。而 视网膜色素上皮细胞中发现的诱导性一氧化氮合成也被认为和吞噬光接受器脱落的外节有 关，在我们的实验中已发现，霍山石斛的粗萃物或区分物在 100m～10mg/ml 浓度下皆可 刺激视网膜色素上皮细胞产生少量的一氧化氮。我们发现霍山石斛中可促进视网膜色素上 皮细胞吞噬活性的有效成份大部份可以促进一氧化氮的产生，但可促进视网膜色素上皮细 胞一氧化氮产生的石斛区分物并不一定可以促进视网膜色素上皮细胞吞噬活性的增加。肝 生长因子为一多所组成的生长因子，已有报导指出视网膜色素上皮细胞可表现肝生长因子 及肝生长因子接受器的讯息核糖核酸。之前，本实验室中已发现肝生长因子可以促进视网 膜色素上皮细胞的吞噬能力。本实验中我们也发现 1mg/ml 的石斛粗萃物可以促进视网膜 色素上皮细胞中 HGF mRNA 的表现。根据这样的结果我们推论石斛也许是藉由调控 HGF 的表现而达到促进视网膜色素上皮细胞的吞噬能力。 　　 我们实验最重要的意义是我们利用科学的方法确认了民间眼科中药霍山石斛的生物 活性，也进一步分离出霍山石斛中具有调节视网膜色素上皮细胞机能的活性物质。我们深 信这些发现将来能有效地应用於眼科疾病的治疗。 4. 吴荣灿，国立阳明大学新药研究中心，8812─8911，霍山石斛生物活性及其有效成分 作用机转的探讨。 5. 吴荣灿，国立阳明大学生物药学研究所，8607─8706，眼科用中药霍山石斛生物活性 及其有效成分的探讨。 6. 吴荣灿，阳明大学生物药学研究所，8708─8807，药用及保健植物---以视网膜色素上 皮细胞为眼底疾病模型探讨中药霍山石斛之药效。 　 [ 摘要 ] 　 　　视网膜色素上皮细胞的最主要机能为吞噬锥状细胞及杆状细胞受光线刺激而脱落 的外节，一氧化氮（NO;Nitric oxide）在眼内的各种机能上扮演重要的角色也在近几年 被广为认知。有许多由视网膜色素上皮细胞病变所引起的视力障碍与疾病，如：增殖性视 网膜病变 ，老年性黄斑部病变，糖尿病导致的视网膜病变等，其 bFGF, VEGF, TGF-. beta. 等生长因子会有不同的表现。因此我们以视网膜色素上皮细胞的吞吃机能为指标， 辅以一氧化氮产生的量及基因的调节来探讨药物的药效与作用机转。霍山石斛是目前民间 最名贵的眼科用药，我们发现霍山石斛可能是经由促进视网膜色素上皮细胞产生微量的一 氧化氮而增强其吞吃机能，证实了霍山石斛之药效，为此传统眼科中药的药效提供合理的 理论基础。我们进一步发现，霍山石斛可以选择性调节在眼底疾病扮演重要角色的基因， 如 bFGF, VEGF, TGF-. beta. 等 mRNA 的表现。肝脏生长因子（Hepatocyte growth factor, HGF），具有调控肝脏再生能力。研究报告指出，在泪腺，眼泪及角膜有 HGF 及 C-met 的存在，新近的研究显示，视网膜色素上皮细胞居然可以分泌 HGF，且 Autocrine 给自己的 C-met receptor，同时对自己有 Mitogenic 及 Chemotaxis 的作 ，因此被认为 HGF 对视网膜色素上皮细胞正常机能的维持扮演重要的角色。而我们的研 究结果显示 HGF 可以促进视网膜色素上皮细胞的吞吃机能，新近的初步结果也显示霍山 石斛水粗萃液可以 Upregulate 视网膜色素上皮细胞 HGF 的基因表现，为中医的 " 清肝 明目 " 的相关性提供科学的佐证。此外，我们引进 RCS（Royal college of surgeon） 大白鼠进行动物实验。RCS 大白鼠是一种先天性视网膜细胞退化大白鼠，病因在於视网膜 色素上皮细胞无法进行吞吃作用，其视网膜感光细胞於出生後逐渐退化，终至消失，是一 个相当理想的视网膜退化的动物模式，在初步的以霍山石斛的水粗萃液，喂食 RCS 怀孕 母鼠及离乳後乳鼠，发现不喂食的控制组在 25 天以後视网膜细胞数量开始逐渐递减，至 五十天左右已几乎没有视网膜细胞存在，而喂食组皆仍有视网膜细胞存在，尤其在 5g/Kg 组效果最为明显。目前霍山石斛的有效成分经有机溶媒萃取，分子筛层析，高速 液态分配层析纯化後，正进行结构分析。在本年度研究中，我们已完成我们的进度，建立 以视网膜色素上皮细胞为眼底疾病试管内细胞及分子生物学研究的模型，提供药物研发基 础。同时也初步的以先天性视网膜细胞退化大白鼠测试了霍山石斛的疗效。我们相信这些 发现将来能有效地应用於眼科疾病的预防或治疗，对视力的维持能有重要的贡献。 7. 吴荣灿，国立阳明大学新药研究中心，8912─9011，霍山石斛生物活性及其有效成分 作用机转的探讨（第二年）。 8. 吴荣灿，国立阳明大学新药研究中心，9012─9111，霍山石斛生物活性及其有效成分 作用机转的探讨。 　 [ 摘要 ] 　 　　视网膜色素上皮细胞在视网膜机能的维持上扮演一个重要的角色，然而至今没有 任何药物可以调节其机能。霍山石斛为有名的眼科中药，我们发现霍山石斛可以增强视网 膜色素上皮细胞吞吃机能，促进其微量 nitric oxide 的产生更进一步发现，霍山石斛可 以选择性调节在眼底疾病扮演重要角色的基因，如 bFGF、VEGF、TGF-β、HGF 等 mRNA 的表现。我们以视网膜色素上皮细胞为试管内研究模型，配合各种色层分析法，由霍山石 斛中纯化出数种活性物质，正进一步进行解析。我们进一步发现霍山石斛萃取物能提高网 膜色素上皮细胞对醣化蛋白质降解活性。正进行作用机转解析中。永丰余公司与本中心配 合已选殖出具有药效之优良品系，开发出霍山石斛在眼科的保健及药效临床应用的潜力。 9. 蔡新声，行政院农业委员会农业试验所农艺系，8908─9007，霍山石斛基原植物之收 集、监定、引种、花期调节及授粉方式之研究（COA）（3/3）。 10. 蔡新声，行政院农业委员会农业试验所农艺系，8808─8907，药用及保健植物─霍山 石斛基原植物之收集、监定、引种、花期调节及授粉方式之研究。（COA）（2/3） 11. 蔡新声，朝阳科技大学应用化学系，9108─9207，珍稀霍山石斛基原植物之收集、分 子监定、授粉适期及大量繁殖种苗之研究（II）。 12 蔡新声，行政院农业委员会农业试验所农艺系，9008─9107，珍稀霍山石斛基原植物 之收集、分子监定、授粉适期及大量繁殖种苗之研究（I）。 　 [ 功效 ] 　 　　具有清肝明目、生津润喉、清热消炎、防癌抗癌之功能。《本草纲目》称它有“ 强阴益精、厚肠胃、补内绝不足、轻身延年”之功效。 　　霍山石斛性甘淡、微寒、有清热消炎、滋阴、生精血、填骨髓、厚肠胃、生津润肺、 清音明目、防癌抗癌、腰腿酸软、失眠多梦、滋养肌肤、调节神经衰弱、增强机体免疫力 、抵御呼吸道感染等功效。 -- 孤独是卓越心灵的命运 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 124.8.163.70