http://jpkc.yzu.edu.cn/course/zhwshl/ppebook/10z/ppe1001.htm 克服不亲和的途径 　　克服自交和远缘杂交不亲和的途径，从遗传上考虑可从选育亲和性品种着手，如从生 理上考虑则从设法避开不亲和性的识别反应着手。 　　1.遗传上克服不亲和的方法 　　(1)选择亲和或不亲和性弱的品种进行种间杂交 如中国目前水稻生产上应用的籼粳杂 交亲本品种，大都是广亲和基因品种。 　　(2)增加染色体倍数 在甜樱桃、牵牛属及犁属等植物中，二倍体植株的自交往往不亲 和，如将二倍体加倍成四倍体，就表现出自交亲和。 　　(3)采用细胞融合法，导入亲和基因。 　　2.生理上克服不亲和的方法 　　(1)避开雌蕊中识别物质的活性期 ① 蕾期授粉法在蕾期雌蕊中不育基因尚未表达， 柱头表面和花柱介质中的识别蛋白尚未形成，而生殖单位有可能成熟，如在此时授粉有可 能完成受精过程。在芸薹、矮牵牛等属的植物上采用此法已得到自交系的种子。② 延期 授粉法 当花开过一定时间後，柱头上或花柱内的不亲和物质的数量减少，活性减弱，对 花粉萌发和花粉管生长的抑制作用降低。因此适当延期授粉有可能克服自交和远缘杂交的 不亲和性。 　　(2)破坏识别物质或抑制识别反应 ① 高温处理 识别物质主要是糖蛋白，而蛋白质会 热变性。将柱头浸入32～60℃热水，或将植株在某个生育期中置於32～60℃的高温环境中 ，可解除番茄、百合、黑麦、犁、樱桃等植物的自交不亲和性。也可用溶剂、振荡、通电 等方法破坏柱头蛋白膜。② 花粉蒙导法 将亲和的花粉杀死并与不亲和的有活力的花粉混 合，然後授混合花粉於雌蕊柱头。由於亲和花粉的存在，使柱头受「蒙骗」而不能很好地 识别不亲和花粉和抑制不亲和花粉的发芽和生长，从而完成受精过程。这种方法已使杨属 与杨柳属、萝卜属与波斯菊属的属间杂交获得成功。③ 辐射诱变 在开花时用低剂量的X- 射线照射番茄、烟草雄蕊，促使花粉产生自交亲和的突变；用强剂量(2000R)的X-射线处 理牵牛花柱，可提高花粉在柱头上的萌发率。辐照改善亲和的原因之一，可能是破坏了识 别物质。④ 激素等试剂处理 用生长素和萘乙酸处理花器，能抑制某些植物落花，这样就 能使生长慢的不亲和花粉管在落花前到达子房，克服和部分克服不亲和性。用放线菌素D 处理，可抑制花柱中DNA的转录，阻断识别蛋白的合成，亦可部分抑制花柱中自交不亲和 的反应。⑤ 重复授粉 柱头上的识别物质是有一定数量的，也许只能抑制一定数量不亲和 花粉萌发。如果用超量的花粉多次授於柱头，干扰识别反应，就有可能克服自交或异交不 亲和性。 　　(3)去除识别反应的组织 　　根据花粉能否萌发、伸长以及受精後有无胚产生，可将不亲和的程度分为六类，如图 10-6所示。针对不同类型的不亲和性可相应采用不同的方法加以克服，这些生物技术方法 都是建立在去除不亲和组织基础上的。 类型①和②的不亲和性发生在子房，可在无菌的条件下将受精胚或连胚珠取出，在培养基 上培养，这样就可避开子房中不亲和物质，有可能再生出植株来。由於在胚的发育初期( 心形胚之前)进行胚培养较为困难，因此类型②可先进行胚珠培养，待胚长大时，再从胚 珠中挑出胚培养。这种先胚珠培养後胚培养的方法就叫胚珠胚培养法。 　　类型③和④的不亲和性发生在花柱中，为了避开花柱中识别物质的干扰，可切除花柱 ，从子房上方切口授粉，这种切除花柱授粉法在百合等植物中取得了成功。另外也可把未 受精的胚珠放在试管或培养皿中，授给花粉，使之受精，这种试管授精法，已使烟草、矮 牵牛等植物的胚珠再生出了植株。 　　类型⑤和⑥的不亲和程度很大，采用普通的方法已难以获得种子。通常认为要采用细 胞融合或DNA导入等生物技术，才能获得杂种。 -- After black clouds, clear weather. --

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