http://www.agrionline.net.cn/keji/lunwenzy/shuoshi/25.htm 中文摘要：以玉米（Zea mays L.）幼胚诱导的愈伤组织为转化受体，用基因枪轰击的方 法将含有编码高赖氨酸蛋白的cDNA（SB401）和hpt基因的质粒p35/35SKH（35/35S启动子 ）和p19ZKH（19Z启动子）导入玉米，分子检测的结果表明在109株再生植株中，44株为转 基因植株（35/35S：18株；19Z：26株），可育的20株（35/35S：11株；19Z：9株）。转 化率在3%以上。Southern杂交结果表明外源基因已遗传至R1和R2代，其中R1代植株中带有 外源基因的占74%，符合孟德尔分离规律（分离比为3：1）。R1、R2代植株的形态和农艺 性状都没有出现异常。Northern和Western的结果表明外源基因在R1代植株的种子中进行 了转录和翻译。测定了R1代成熟种子中赖氨酸和总蛋白含量，表明有14株的赖氨酸含量提 高10%以上，33株总蛋白提高10%以上。其中在90-4号（转p19ZKH）R1植株的成熟种子中， SB401蛋白的积累水平达到了种子水溶性蛋白的2.5%，赖氨酸含量和种子总蛋白的含量分 别为0.48g/100g种子（对照组为0.31g/100g种子）和15.04g/100g种子（对照组为 10.82g/100g种子），分别提高了54.8%和39%。Northern杂交分析的结果表明，在34-5（1 个拷贝）、90-4（2个拷贝）、88-2（3个拷贝）这3个不同拷贝数的纯合R1株系的幼嫩种 子中（14DAP），90-4的mRNA积累水平最高，34-5次之，88-2最低；在34号R0植株（1个拷 贝）的3个纯合R1株系34-1、34-3、34-5的幼嫩种子中（14DAP），mRNA的积累水平出现了 明显差异。以上结果表明外源基因的表达水平与基因的拷贝数可能没有相关性。在我们的 实验条件下，没有发现SB401蛋白在玉米胚乳中的积累对种子的生长发育有任何影响，因 此它可以用於提高玉米种子中赖氨酸含量的基因工程，改良玉米营养品质。 关键词：玉米；高赖氨酸；品质改良；表达水平；拷贝数 -- 缓慢...... --

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